抗体蛋白糖型分析
抗体(免疫球蛋白,Ig)由适应性免疫系统产生,以识别和中和宿主体内外来抗原和病原体。在人体中,五类已知的Ig(IgG,IgM,IgA,IgE和IgD)在免疫反应期间由B细胞以可变量分泌。尽管这些不同种类的Ig是从Ig结构域构建的,因此在结构上是相关的,但它们在几个方面有很大的不同,例如它们的糖基化。大量研究表明,抗体蛋白的糖基化修饰特别是半乳糖程度,与年龄、性别、遗传性、妊娠、自身免疫性疾病、传染病和癌症有关。因此,研究抗体糖基化修饰对临床诊断和治疗具有重要意义。
糖基化分析,特别是抗体的糖基化分析可以通过(a)完整的糖蛋白分析,(b)糖肽的表征,或(c)化学或酶促释放的聚糖的结构分析一系列流程实现。抗体蛋白糖型分析就是对结合在抗体上的糖链结构进行鉴定,需要解析的糖链结构包括特定位点是否连接有多种不同的糖链、糖链的单糖组成和连接顺序;单糖的差向异构、绝对构型和环形;糖链上非糖取代基的连接位置等。糖型的分析复杂而艰巨,目前没有任何一种技术能解决所有问题,也不具备规模化分析糖链组成结构的技术条件,分析糖链需要结合多种不同的分析方法。最直接的分析糖链的方法是基于串联质谱的母离子扫描技术和MALDI-TOF的中性丢失方法。
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