N糖基化位点分析
N- 糖基化(N-glycosylation)是真核生物体内一种常见的糖基化修饰形式,在糖基转移酶的作用下,寡糖链与蛋白质上的特定氨基酸残基—天冬酰胺之间形成酰胺键,从而结合到蛋白质上。N-糖基化位点即发生N-糖基化修饰的氨基酸位点,N-糖基化位点分析通过蛋白质酶解和质谱技术,识别并定位蛋白质中发生N-糖基化的特定氨基酸残基,分析结果可揭示蛋白质的结构和功能,这对于保证生物制品发挥正常功能至关重要。对N-糖基化位点的深入分析有望揭示更多的生物学奥秘并指导新药物的开发。
百泰派克生物科技BTP通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证。公司基于稳定、高效的液相色谱高分辨质谱(LC-MS/MS)开发了一系列糖基化表征方法,为您提供高质量的一站式N糖基化位点分析服务,包括N糖链分析、N糖基化位点鉴定以及糖肽解析的完整分析流程。欢迎免费咨询,了解更多详情!
实验仪器
• NanoLC: Vanquish NEO
• MS: Orbitrap Fusion Lumos
案例示意
利用在重水中使用PNGase F来释放糖链并标记18O的方法进行N-糖基化位点分析。首先,根据蛋白质的理论氨基酸序列信息,选择适当的蛋白酶将蛋白质切割成肽段。待溶剂挥发后,我们在重水中进行切糖处理。然后,通过液相色谱-高分辨质谱技术,我们能够确定带有18O修饰的N-糖基化位点所在的肽段,从而确定N-糖基化的位置。
图2 N糖基化位点二级图
注:图中N糖基化修饰在肽段第八位氨基酸上,分子量变化为+2.988,横坐标为质荷比,纵坐标为信号强度
中/英文项目报告
在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. N糖基化位点分析详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
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