SILAC蛋白组

SILAC蛋白组或SILAC定量蛋白组学,是指利用SILAC技术对蛋白质组进行定量研究。百泰派克生物科技提供基于SILAC标记的定量蛋白组分析服务。

SILAC

在基于质谱(MS)的定量蛋白质组学中,SILAC(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture)是通过在细胞培养过程中加入稳定同位素标记的氨基酸对样品进行标记后结合质谱检测,对样品进行蛋白质组学分析的方式是一种简单、可靠而又强大的方法。SILAC通过正常代谢过程对细胞蛋白进行标记,在新合成的蛋白质中加入非放射性的、稳定的含同位素的氨基酸。SILAC提供了准确的相对定量,不需要任何化学衍生或操作,即可实现蛋白质组学分析。SILAC属于体内标记技术,使样品更接近自然状态,其标记效率高达100%,且标记效果稳定,适合于全细胞蛋白分析,以及膜蛋白的鉴定和定量,每个样本只需要几十微克的蛋白量。

SILAC蛋白组分析

SILAC定量蛋白组分析的实验流程是:在细胞培养基中加入轻、中或重型稳定同位素标记的必需氨基酸赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg),在细胞生长过程中,新合成的蛋白质带上稳定同位素标签。培养一段时间后,等量混合细胞培养物中各类型蛋白质,酶解后进行质谱分析。由于质量差异,可以在质谱仪中区分带有不同稳定同位素组成的化学性质相同的肽对。通过比较一级质谱图中不带标记和带同位素标记的质谱峰型的面积大小即可进行相对定量,同时二级谱图还可以对肽段进行序列测定从而进行蛋白鉴定。

SILAC蛋白组

SILAC蛋白组

相关服务

基于SILAC/Dimethyl标记的定量蛋白组分析
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