质谱检测组蛋白修饰

质谱是对组蛋白翻译后修饰进行全局、无偏、定量分析的强大工具,可以对组蛋白翻译后修饰进行定性、定量和位点鉴定。百泰派克生物科技提供基于质谱的组蛋白翻译后修饰分析服务。

组蛋白修饰检测

核小体是染色质的最小结构单位,由组蛋白八聚体包裹有147个碱基对的DNA组成。组蛋白功能由广泛的翻译后修饰(post-translational modification,PTM)介导,这些修饰对于核完整性至关重要,因为它们调节染色质结构并募集参与基因调控、DNA修复和染色体浓缩的酶。采用基于抗体的技术(如western blot)可以表征组蛋白翻译后修饰的丰度,但这些方法的通量较低且不能识别未知的PTM。质谱是对组蛋白翻译后修饰进行全局、无偏、定量分析的强大工具。质谱方法可对单个样品中的60多个修饰状态进行定量,远远超出了传统蛋白质印迹(western blot)的能力。因此,基于质谱的组蛋白分析已成为了解遗传和环境因素如何影响表观遗传状态的一种越来越流行的工具。

质谱检测组蛋白修饰

质谱检测组蛋白修饰

质谱检测组蛋白修饰

质谱检测组蛋白修饰常常采用自下而上的策略,将完整的组蛋白用酶消化成短肽。由于组蛋白富含精氨酸和赖氨酸残基,胰蛋白酶消化会导致产生的肽段太小,因此,消化前可通过丙酸酐衍生化组蛋白未修饰和单甲基化的赖氨酸残基,以防止胰蛋白酶裂解赖氨酸。在液相色谱与质谱联用(LC-MS)时,产生适当大小的肽,以实现最佳离子化效果。组蛋白修饰质谱检测不仅可以对修饰进行定性和定量,还可以进行组蛋白修饰位点鉴定。

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组蛋白翻译后修饰分析

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