定量泛素化蛋白组分析

质谱不仅可以用于蛋白质泛素化的鉴定,也可以用于泛素化蛋白组的定量。百泰派克生物科技提供基于质谱的泛素化定量蛋白组学研究服务。

定量泛素化蛋白组分析

定量泛素化蛋白组分析,是在组学的水平上对泛素化蛋白质进行定量分析。泛素是一个由76个氨基酸残基组成的非常保守的多肽,能在酶的作用下与细胞内靶蛋白上的一个或多个赖氨酸残基发生共价连接。泛素化蛋白质指连接有泛素的蛋白质。蛋白质泛素化参与了多种生命活动,与疾病的发病机理也有关,分析泛素化蛋白质组有助于生命活动和疾病发生的研究。

定量泛素化蛋白质组分析质谱

利用质谱的方法可以实现泛素化蛋白质组的定量分析。由于泛素化蛋白质在生物样本中含量低且动态范围广,质谱分析前一般需要对泛素化蛋白和肽段进行富集以提高其丰度,然后再利用传统的定量蛋白组分析手段对富集得到的泛素化肽段样品进行定量分析。在基于质谱的泛素化定量蛋白组学研究中,首先要对泛素化的蛋白进行胰酶消化,其赖氨酸的修饰位点上会产生两个甘氨酸的残基,利用针对该残基的试剂盒对泛素化肽段进行特异性的富集。之后使用HPLC对样品进行预分离,再使用抗特殊残基结构的抗体进行泛素化肽段的富集,可以极大地提高泛素化蛋白的鉴定量,从而更好地实现泛素化蛋白组的定量。

定量泛素化蛋白组分析

定量泛素化蛋白组分析

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