免疫沉淀和免疫共沉淀的区别

免疫沉淀主要用于分离目标蛋白,免疫共沉淀主要用于分离目标蛋白复合物,后者可用于分析蛋白与蛋白的相互作用。百泰派克生物科技提供免疫共沉淀分析蛋白互作的服务。

免疫沉淀

免疫沉淀Immunoprecipitation,IP)可分为广义的和狭义的两种情况。广义的免疫沉淀技术包括了单个蛋白质免疫沉淀(IP)、蛋白质复合物免疫沉淀(Co-IP)、染色质免疫沉淀(ChIP)和RNP免疫沉淀(RIP)等。这里主要介绍狭义的免疫沉淀,即单个蛋白质免疫沉淀(IP),可用于从含有多种不同蛋白质的样品中分离和浓缩特定的蛋白质。在单个蛋白质免疫沉淀(IP)实验中,首先将抗体(一抗)添加到含有抗原的混合物中,然后孵育以形成抗原抗体复合物。之后将抗原抗体复合物与针对一抗的固定化抗体(第二抗体)或与蛋白A / G包被的珠子一起温育,以使吸收抗体抗原复合物。最后将珠子彻底清洗,分离目的抗原蛋白和其他蛋白即可。

免疫共沉淀

免疫共沉淀(Co-IP)是一种广泛应用于发现和检测蛋白质与蛋白质相互作用的技术。在Co-IP实验中,首先要使用非离子型表面活性剂来裂解细胞以更好的保留蛋白质与蛋白质的相互作用,然后加入某一蛋白(诱饵蛋白)的专一性抗体,抗体会与诱饵蛋白结合使诱饵蛋白沉淀,同时细胞内与诱饵蛋白相互作用结合在一起的其它蛋白也会沉淀来下,即共沉淀。

免疫沉淀和免疫共沉淀的区别

关于IP和Co-IP的差异,主要是 IP专注于结合抗体的主要靶标(Co-IP中的诱饵蛋白),而Co-IP则是靶向次要靶标(与诱饵蛋白互作的蛋白)。免疫共沉淀得到的是诱饵蛋白及其互作蛋白的复合物,可以用于检测和鉴定天然状态蛋白质之间的相互作用。

相关服务

CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

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