肽分子量测定和肽分子量分布检测

肽分子量测定是对肽的相对分子质量进行测定,肽分子量分布检测是对混合肽中不同大小的肽分子的组成进行检测。HPLC与质谱联用可以实现肽分子量准确测定和肽分子量分布检测。百泰派克生物科技提供基于HPLC和质谱的肽分子量测定和肽分子量分布检测。

肽分子量测定

肽是由两个至五十个氨基酸组成的分子,可以细分为由两个至二十个氨基酸组成的寡肽,和由二十至五十个氨基酸组成的多肽。肽分子量测定就是对寡肽或多肽的相对分子质量进行测定。肽的相对分子质量是肽分子的一个重要属性,可以用于肽分子的鉴定等。测定肽分子量的方法主要包括有测定肽链长度法、聚丙烯酰氨凝胶电泳、光散射法、超速离心沉降法,以及质谱法等。对于较纯的肽,我们可以直接对其进行分子量测定,但是对于混合肽样品来说,我们常常先会对其分子量分布进行检测。

肽分子量分布检测

肽分子量分布检测是指对混合肽样品中不同大小肽分子的分布进行检测。具有生物活性的肽称为活性肽,活性肽在有机体中参与多种生命活动的调节,且活性肽的开发利用现已遍布医药、食品、保健和化妆品等行业。分子量分布是活性肽产品的重要指标,反映了活性肽产品中不同分子量大小的肽类的组成。检测肽分子量分布的方法可以用聚丙烯酰氨凝胶电泳和质谱法,但是聚丙烯酰氨凝胶电泳不适合测定分子量较小的肽,质谱法可以很准确的测定肽的分子量但是需要先对混合肽进行分离纯化后才能检测,因此不能直接用于分子量分布检测。高效液相色谱相对于这两种方法来说,在测量肽分子量分布方面较为有效便捷。

多肽样品分子量示意图

多肽样品分子量示意图

肽分子量分析HPLC

HPLC即高效液相色谱,也可以叫凝胶色谱技术,是一种分离分析技术。HPLC用于多肽分子量分析的基本原理是不同大小的肽分子在HPLC色谱柱中的分布情况不同,较大的分子只能进入孔径较大的孔隙内,较小的分子则可以进入较多的孔隙内,这样不同分子量的分子通过柱子出来的时间就不同,通过这个时间就可以将不同大小的肽分子进行分离。HPLC测定肽分子的分子量首先需要通过测标准品得到标准曲线,再将测得的肽分子的保留时间通过标准曲线进行计算得到其分子量。HPLC通过这种间接的方法测得的肽分子量相对来说不是很准确,但在检测混合肽的肽分子量分布时便捷有效。如果想得到更准确的肽分子量,可以将HPLC与质谱联用,这样既可以有效的检测肽分子量分布又可以准确测定肽分子量。

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