流式多因子

    随着流式细胞术和固相化技术的普及和基于微球的多指标检测技术的革命式发展,采用流式细胞术同样可以对可溶性蛋白质进行定性和定量分析。与传统ELISA 技术只能检测一个指标相比,流式多因子检测技术能够实现从一份标本中同时检测多种指标,大大提高了科研人员的工作效率以及实现了对稀少珍贵样品的多指标分析。其中代表技术是Luminex和BD CBA (cytometric bead array system, CBA), 以及eBioscience公司旗下的FlowCytomix技术。百泰派克公司采用BD公司的CBA技术以及FlowCytomix技术为广大科研人员提供多参数细胞因子或其它可溶性分子检测服务。

    检测原理:

    该技术的检测原理与夹心法免疫测定相同。荧光微球被选择的抗原特异的抗体包被。已包被了抗体的微球混合物与样本进行孵育。样本中的待检物(如细胞因子等)与微球上包被的抗体结合。生物素标记的抗体混合物,与结合于捕获抗体(微球)的待检物特异性结合。最后加入Streptavidin-PE,与生物素结合进行荧光检测。流式细胞仪根据微球大小和荧光标记强弱来区分微球群。2种大小的微球(4.4μm, 5.5μm)内部分别标记 9、11种不同强度的荧光染料(远红荧光,可被氩、氦氖甚至紫外光源激发,发射波长690nm),构成了20种可以同时被流式细胞仪识别和区分的不同微球故可以同时在一份标本中进行多达20种指标的检测。

    流式细胞因子检测

    流式细胞因子检测-百泰派克

    百泰派克提供以下流式多因子检测服务:


    技术优势:

    与传统的ELISA检测相比,采用流式进行多因子检测有以下优点:

     

    流式多因子检测 ELISA
    样品需求量少 样品需求量大
    适用性广,可对各种体液进行检测 仅适用于血浆等常见体液
    一次可检测多个细胞因子 一次仅可检测一个细胞因子
    可随机组合所需的检测目标 每次检测均需要重新提供样本
    检测时间短 检测时间长,需要长时间的孵育
    同样的灵敏度,更宽的检测范围 检测范围窄

      

    流式细胞因子检测优点

    抗体的选择

    目前有上百种的抗体适用于该项技术,并可以根据科研的不同需求进行随机组合开发。其中我们将常见的检测因子组合,开发成一系列流式试剂盒,大大缩短了抗体定制所需要的时间。针对人体样本,大鼠样本,小鼠样本的单因子和多因子流式试剂盒见下表(更多的抗体正在开发中,请来电咨询):

     

    人体样本多因子流式试剂盒 检测因子
    Th1/Th2 11plex IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12 (p70), TNF-α, TNF-β
    Th1/Th2 11plex IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12 (p70), TNF-α, TNF-β
    Th1/Th2/Th9/Th17/Th22 13plex IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-12 (p70), IL-13, IL-17A, IL-22, TNF-α
    Chemokine 6plex G-CSF, IL-8, MCP-1, MIG, MIP-1α, MIP-1β

     

    人体样本本单因子流式试剂盒 灵敏度 标准范围
    sCD30 5.1 pg/ml 0.3 – 250 ng/ml
    sE-selectin 1.2 ng/ml 4.0 – 3,000 ng/ml
    sICAM-1 5.3 ng/ml 5.4 – 4,000 ng/ml
    IFN-γ 1.6 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-4 20.8 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-5 1.6 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-6 1.2 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-8 0.5 pg/ml 13.7 – 10,000 pg/ml
    IL-9 1.5 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-10 1.9 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-12 (p70) 1.5 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-13 4.5 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-17A 2.5 pg/ml 13.7 – 10,000 pg/ml
    IL-17A/F 16 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-17F 8.0 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-18 3.34 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    sL-selectin 70 pg/ml 137 – 100,000 pg/ml
    MCP-1 2.2 pg/ml 41 – 30,000 pg/ml
    MCP-9 95 pg/ml 0.1 – 100 ng/ml
    NGF 126.75 pg/ml 412 – 300,000 pg/ml
    RANTES 25 pg/ml 41 – 30,000 pg/ml
    TGF-β1 10.0 pg/ml 13.7 – 10,000 pg/ml
    TIMP-1 28 pg/ml 137 – 100,000 pg/ml
    TNF-α 3.2 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    sVCAM-1 0.9 ng/ml 3.0 – 2,000 ng/ml

     

    小鼠样本多因子流式试剂盒 检测因子
    Th1/Th2 10plex GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17, TNF-α
    Th1/Th2/Th17/Th22 13plex IFN-γ, IL-1α, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IL-17A, IL-21, IL-22, IL-27, TNF-α
    Chemokine 6plex GM-CSF, MCP-1, MCP-3, MIP-1α, MIP-1β, RANTES

     

    小鼠样本单因子流式试剂盒 灵敏度 标准范围
    CXCL1/KC 5.1 pg/ml 0.3 – 250 ng/ml
    sE-selectin 1.2 ng/ml 4.0 – 3,000 ng/ml
    IFN-γ 5.3 ng/ml 5.4 – 4,000 ng/ml
    IL-4 20.8 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-5 1.6 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-6 1.2 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-10 1.9 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-12 (p70) 1.5 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-13 4.5 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-17A 2.5 pg/ml 13.7 – 10,000 pg/ml
    IL-17A/F 16 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-17F 8.0 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-18 3.34 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml
    IL-33 70 pg/ml 137 – 100,000 pg/ml
    MCP-1 2.2 pg/ml 41 – 30,000 pg/ml
    RANTES 25 pg/ml 41 – 30,000 pg/ml
    TGF-β1 10.0 pg/ml 13.7 – 10,000 pg/ml
    TNF-α 3.2 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml

    小鼠样本单因子流式试剂盒

     

    大鼠样本多因子流式试剂盒 检测因子
    Cytokine 6plex GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-4, MCP-1, TNF-α

      

    大鼠样本多因子流式试剂盒

     

    大鼠样本单因子流式试剂盒 灵敏度 标准范围
    IFN-γ 0.6 pg/ml 3.0 – 2,000 pg/ml
    IL-4 0.3 pg/ml 3.0 – 2,000 pg/ml
    IL-17A 5.0 pg/ml 7.0 – 5,000 pg/ml
    MCP-1 0.5 pg/ml 7.0 – 5,000 pg/ml
    TNF-α 4.3 pg/ml 27 – 20,000 pg/ml

     

    大鼠样本单因子流式试剂盒

    关于样品

    1. 只需25µL样品,而常规的ELISA需要50µL或者100µL样品。
    2. 适用于血清,血浆,细胞培养上清以及各式体液。
    3. 体液样品储存于-80摄氏度冰箱中,使用干冰进行运输。

    中/英文项目报告:

    在最终的技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

    1, 实验步骤(中英文)
    2, 原始数据(荧光发光图谱)
    3, 技术报告
    4, 各检测指标绝对含量(Excel表格)

    流式多因子检测一站式服务

    您只需下单-寄送样品
    百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

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