想了解bluenative page实验以及二向BN-SDS-PAGE的步骤，还有阴阳缓冲液。
- 样品缓冲液（阴性缓冲液）: 50 mM Bis-Tris (pH 7.0), 50 mM NaCl, 10% (w/v) 甘油, 0.001% Ponceau S, 加入一定量的Coomassie Blue G-250以保持蛋白质的负电荷。
- 阳性缓冲液（上样缓冲液）: 5% Coomassie Brilliant Blue G-250, 500 mM 6-aminohexanoic acid, 100 mM Bis-Tris (pH 7.0)。
- 分离凝胶和聚集凝胶液，以及BN-PAGE运行缓冲液：通常含有15 mM Bis-Tris (pH 7.0) 和50 mM Tricine。
- SDS-PAGE 上样缓冲液：含有SDS 和DTT，用于在第二维中分离蛋白复合体的组分。
一、Blue Native PAGE (BN-PAGE)
实验材料和溶液
步骤:
1.样品准备: 将样品在含有Coomassie G-250的缓冲液中处理，以保持蛋白复合体的非变性状态。
2.凝胶制备: 根据目标蛋白的大小和复杂度，准备适当浓度的分离凝胶和聚集凝胶，
3.样品加载和电泳：将样品加载到凝胶上，使用BN-PAGE运行缓冲液在4°C下进行电泳。
4.染色/检测: 电泳结束后，使用考马斯亮蓝或特定的蛋白染色剂对蛋白进行染色和检测。
二、二维BN-SDS-PAGE
二维BN-SDS-PAGE 在BN-PAGE 的基础上增加了一个维度，用以在第二维中通过SDS-PAGE 分析蛋白质复合体的组分。
第二维材料和溶液
步骤:
1.第一维BN-PAGE: 如上述BN-PAGE步骤进行。
2.准备第二维: 将第一维电泳的凝胶条切下，用含有SDS的上样缓冲液孵育一段时间，以便于SDS渗透进凝胶并与蛋白结合。
3.第二维SDS-PAGE: 将处理过的凝胶条放置在SDS-PAGE凝胶上，并进行第二维电泳。这一步将基于蛋白质的大小进一步分离第一维中的复合体组分。
4.染色/检测: 与BN-PAGE相同，使用考马斯亮蓝或银染对凝胶进行染色和检测。
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