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百泰派克

蛋白质相互作用分析

蛋白相互作用是指两个及以上的蛋白质分子结合形成蛋白质复合体的一个过程。一般情况下蛋白质很难单独发挥作用,都是由多个蛋白质分子的相互协调共同实现复杂的细胞功能。因此专注于蛋白相互作用的研究更加利于探索疾病的发生发展、找寻特定的疾病预测治疗方法,并且在新药研发的研究方面提供新的思路。蛋白质互作分析的方法较多,百泰派克提供基于体外的蛋白质互作分析服务,包括:免疫共沉淀法(CO-IP),GST融合蛋白pull-down技术,串联亲和纯化技术及蛋白质微阵列。并提供基于液质联用技术(LC-MS/MS)对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物的质谱鉴定分析服务。点击了解更多:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定GST融合蛋白Pull down靶蛋白质谱鉴定

1,免疫共沉淀法(CO-IP)蛋白质相互作用分析

免疫共沉淀法(CO-IP)利用抗原抗体之间的特异性来检测蛋白质之间的生理性相互作用的一种方式。首先在实验中为了最大限度的保留细胞中蛋白的相互作用,会使用非离子变性剂来裂解细胞。当细胞裂解时,细胞内的蛋白相互作用被保存下来,在其中加入相应的抗体,使抗体与细胞中的特异蛋白质结合,再加入蛋白A/G形成抗体蛋白复合物,进行离心、分离,使抗体蛋白复合物沉淀,弃去上清液,最后用质谱技术鉴定沉淀下来的蛋白质,进而证明两者间的相互作用。仅适用于分析稳定或者强烈的蛋白质间相互作用;通常用来鉴定某个目标蛋白质与另一个蛋白质之间相互作用或者被用来寻找与某个目标蛋白质存在相互作用的未知蛋白质。

百泰派克生物科技针对样品蛋白的提取,表达和纯化的优化方案可确保获得高质量的诱饵和猎物蛋白,为客户提供优质的Co-IP蛋白互作分析服务及对免疫共沉淀CO-IP获取的蛋白进行蛋白质谱分析。点击了解更多: 蛋白质CO-IP免疫共沉淀法技术服务基于质谱的免疫共沉淀CO-IP样品蛋白质谱鉴定

百泰派克蛋白质相互作用分析

• 优点:可分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合物;
• 缺点:灵敏度较低;不能进行亲和力低和瞬间的蛋白质相互作用分析检测。

2,GST融合蛋白pull-down沉降技术的蛋白质相互作用分析

GST融合蛋白pull-down沉降技术,利用基因重组将带有GST标签的载体插入到目标蛋白A上,谷胱甘肽包裹的磁珠与目标融合蛋白结合,加入细胞裂解液后,具有相互作用的蛋白被融合蛋白吸附,加入过量的谷胱甘肽进行洗脱,最后用MS技术分析。这种方法主要是研究体外强烈或者稳定的蛋白质间相互作用;可以鉴定两种已知的感兴趣蛋白质可能存在的直接相互作用;寻找可能与目标蛋白存在相互作用关系的未知蛋白。

作为技术依托型的科研技术服务公司,百泰派克生物科技在蛋白互作分析服务及基于质谱的互作蛋白质质谱鉴定分析方面拥有多年经验。百泰派克提供基于GST pull-down蛋白互作分析服务,及Pull-down靶蛋白质谱鉴定服务。我们以严格的质量控制和较短的检测周期为特色,百泰派克向客户提供可定制的一站式服务,涵盖您项目中从基因合成到数据报告的每个步骤。点击了解更多: GST融合蛋白pull-down沉降技术服务Pull-down靶蛋白质谱鉴定

• 优点:可排除细胞内其他情况的干扰;可以直接检测蛋白质之间是否有相互作用;方法简单,操作方便。
• 缺点:在细胞外进行,不能准确的反应细胞内的蛋白质相互作用关系。

3,串联亲和纯化技术(TAP)蛋白质相互作用分析

串联亲和纯化技术(TAP),可以快速研究在生理条件下蛋白相互作用,在寻找、纯化互作蛋白的原理方面与免疫共沉淀相似,TAP实施2步亲和纯化,可以高效减少非特异性蛋白质的结合。实验流程:蛋白质进行标记-构建表达标记蛋白的细胞或组织-抽提物的准备-蛋白纯化。适用于鉴定新的蛋白质复合体;鉴定已知蛋白质复合体中的新组分。
• 优点:可鉴定出非直接物理相互作用的蛋白质;实验结果更加接近真实情况;可普遍用于蛋白质水平的筛选;周期短、假阳性结果少。
• 缺点:不能对不稳定和短暂的蛋白质相互作用进行分析。

4,蛋白质微阵列(Protein microarrays) 蛋白质相互作用分析

蛋白质微阵列(Protein microarrays) 使用探针蛋白或抗体点阵可以捕捉样品中的靶蛋白,如果两者发生相互作用,则在芯片的表面形成蛋白质复合物,然后用相应仪器获取数组图像,最后用进行数据分析。
• 优点:多种参数可同时进行测定;用量少。
• 缺点:具有设备和材料的限制;成本较高。

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