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百泰派克

SILAC与免疫共沉淀质谱联用的蛋白互作分析

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是一项基于抗体特异性识别特定抗原的这一原理研究蛋白质相互作用的经典方法。免疫共沉淀常用于检验生理状态下蛋白质间的相互作用,通过与质谱(MS)联用可以用于鉴定发现新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC方法分别标记实验组和对照组细胞后进行Co-IP实验,依靠抗原与抗体之间的专一性反应分离得到免疫复合物;再通过LC-MS/MS来定性/定量检测免疫复合物中的蛋白;当实验组与对照组中某个蛋白质的含量达到统计学差异时,判定这个蛋白质与研究的蛋白具有相互作用,可极大降低蛋白质互作假阳性结果可能性。SILAC技术和Co-IP-MS技术结合可用于高通量定量分析在特定情况下蛋白的互作蛋白网。

SILAC 的联用从源头引入质量差异,降低了实验系统误差,定量信息丰富,准确度高。百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出SILAC与免疫共沉淀质谱联用的蛋白互作分析服务技术包裹(SILAC-based CoIP-MS),您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的细胞寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括细胞培养、细胞标记、蛋白提取、抗体IP、效率检测、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。

SILAC-based CoIP-MS实验流程

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SILAC-based CoIP-MS实验流程

BTP-SILAC-based CoIP-MS 技术特点和优势

• 尽量保留蛋白质结构和翻译后修饰
• 蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响
• 可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物
• 高通量,可快速全面分析所有相互作用的蛋白质
• 可与对照组对比辨别非特异结合蛋白,低假阳性
• 能比对分析出各个互作蛋白的相对丰度

SILAC-based CoIP-MS实验项目样品要求

蛋白质样品:样品浓度> 0.1 μg/μl;蛋白质总量> 300 μg
动物细胞> 1*10^7个
新鲜组织> 100mg

1.您只需使用干冰将冻存细胞寄给我们即可,同时保证细胞具有可以传代培养5次以上的能力;
2.如果您需要自己标记细胞并完成细胞的刺激等处理过程,您只需要将标记完成并且经过处理的细胞样品或者蛋白样品干冰寄给我们即可;对于每个样品,需要保证至少含有300 ug蛋白总量。

注意:样品运输请使用足量的干冰运输,并且尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。

中/英文项目报告

在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 鉴定的蛋白质的详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
6. 生物信息学分析

SILAC-based CoIP-MS一站式服务

您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

How to order?
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