糖谱检测

    糖基化是蛋白质的一种重要的翻译后修饰。根据糖链和肽链的连接方式的不同,蛋白质的糖基化可分为N-糖基化和O-糖基化。N-糖基化是通过糖链的还原端的N-乙酰氨基葡萄糖(Glc-NAc)和肽链中某些Asn侧链酰氨基上的氮原子相连。能接有糖链的Asn必须处于 Asn-X-Ser/Thr 3残基构成的基序(motif)中,其中X可为除Pro的任意的氨基酸残基。O-糖基化的结构比N-糖基化简单,一般糖链较短,但是种类比N-糖基化多得多。肽链中可以糖基化的主要是Ser和Thr,此外还有酪氨酸、羟赖氨酸和羟脯氨酸,连接的位点是这些残基侧链上的羟基氧原子。百泰派克生物科技基于高分辨率质谱仪Obitrap Fusion Lumos,利用包含了几乎所有糖型的Byonic软件针对肽段、蛋白和抗体药物进行糖基化分析,可以确定肽段或者蛋白样品糖基化位点、N糖/O糖类型、糖基化位点糖组成。

    百泰派克生物科技提供基于质谱的生物药糖基化分析服务,可以确定肽段或者蛋白样品糖基化位点、N糖/O糖类型、糖基化位点糖组成。

     


    糖谱检测和分类

     

    案例分析:

    服务案例为对一位客户提供的重组蛋白药物进行糖谱检测。拿到客户提供的理论序列之后,我们首先对序列进行了分析以确认适合项目使用的蛋白酶;通常情况下,我们会选择两种以上的蛋白酶进行酶切,以提高的肽段覆盖率;使用不同的蛋白酶进行酶切,产生不同的肽段序列,利用肽段序列相互之间的互补关系,帮助提高糖谱分析的肽谱覆盖率。以下是之前项目的部分实验数据,该项目中客户提供的是重组蛋白样品,在我们选择了合适的蛋白酶组合之后,肽段覆盖率如下图所示:

    20221219-3412-糖谱检测2.png

     

    20221219-4691-糖谱检测3.png

     

    20221219-5936-糖谱检测4.png


    该项目中,与理论序列相比,肽段覆盖率为94%,未鉴定到的6%的序列为信号肽,在重组蛋白分泌过程中已经被切掉,因此实际的肽段覆盖率为100%。

    经过Byonic软件分析之后,鉴定到的糖肽相关总结如下:

    20221219-6382-糖谱检测5.png

     

    20221219-7257-糖谱检测6.png


    在结题报告中,我们还会提供鉴定到的每一个糖肽的二级质谱图信息,如下图所示:

    20221219-8125-糖谱检测7.png

    中/英文项目报告

    在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

    1. 实验步骤(中英文)
    2. 相关的质谱参数(中英文)
    3. 质谱图片
    4. 原始数据
    5. 糖谱检测结果

    生物药糖谱检测一站式服务

    您只需下单-寄送样品
    百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

    相关服务

    生物制药分析
    生物药糖基化位点检测
    蛋白糖基化修饰分析
    糖组学分析服务
    糖蛋白分析
    糖型分析

     

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