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百泰派克

高分辨质谱分子量鉴定

目前广泛使用的用于蛋白质鉴定的质谱分析主要使用两种类型质谱:一种是MALDI-TOF直接对分子量进行测量;另一种是使用ESI-MS高分辨率质谱分析电喷雾得到的多电荷信号,然后对信号进行去卷积分析,获得精确分子量数值。这两种方法各有其优点及适用的领域。百泰派克生物同时配备了这两种质谱分析系统,可用于各类蛋白质样品分子量测定,满足包括肽指纹图谱分析及蛋白质鉴定在内的多种蛋白质分子量分析需求。

百泰派克生物科技累计多年质谱经验推出:抗体类蛋白质药物,还原后抗体类样品的不同亚基,小分子量(<10KDa)蛋白质样品的精确分子量测定一站式服务
ESI电离喷雾测定分子量

案例分析:

1 大于10KDa分子量的某蛋白药物精确分子量测定
百泰派克通过online反相色谱分离后,直接用Q Exactive质谱仪对原始信号进行采集。然后使用ProMass for XcaliburTM对原始数据进行deconvolution计算,得到样品精确分子量。

进入质谱之前的反相色谱分离过程中连接了紫外检测器(如下图所示),在实现对样品分离的同时,还会对样品的纯度进行评估;色谱分离的过程也降低了在精确分子量检测过程中对样品纯度的要求。

进入质谱之前的反相色谱分离过程中连接了紫外检测器

利用软件对质谱原始数据进行分析时,可以根据TIC(总离子流图)分别对样品中的主要成分和次要成分的分子量进行选择和分析。

利用软件对质谱原始数据进行分析时,可以根据TIC(总离子流图)分别对样品中的主要成分和次要成分的分子量进行选择和分析

例如我们对上图中红框标注的主要成分进行分子量分析,我们只需要找到该时刻得到质谱原始数据(如下图所示)。

质谱原始数据

然后对上述原始数据进行去卷积处理,得到该蛋白样品中主要成分的精确分子质量(如下图所示)。

对原始数据进行去卷积处理,得到该蛋白样品中主要成分的精确分子质量

2 小于10KDa分子量的某肽段药物精确分子量测定
百泰派克生物科技通过online反相色谱分离后,直接用Q Exactive质谱仪对原始信号进行采集,然后利用经典的计算分子量的方法对原始数据直接进行计算,得到样品精确分子量。
进入质谱之前的反相色谱分离过程中连接了紫外检测器(如下图所示),在实现对样品分离的同时,还会对样品的纯度进行评估;色谱分离的过程同样也降低了在肽段精确分子量检测过程中对样品纯度的要求。

进入质谱之前的反相色谱分离过程中连接了紫外检测器

在进行肽段精确分子量计算的过程中,我们只需要找到肽段洗脱时间点的质谱原始数据(如下图所示)

按照经典的计算分子质量的方法,同时对带有两个以上电荷的分子进行分子量计算,得到该肽段样品的精确分子质量。

同时我们还会给高丰度的带电离子质谱原始数据供您参考(如下图所示)。

MALDI 与ESI的优缺点比较:

进入质谱之前的反相色谱分离过程中连接了紫外检测器

在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 蛋白质/多肽分子量信息

高分辨率质谱分子量测定一站式服务

您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

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