自由巯基定量

    自由巯基是半胱氨酸中的硫原子形成的一种特殊结构。自由巯基非常活泼,可以与其他蛋白质结合而改变其结构和功能,也可以与氧分子反应产生氧化物损害细胞和组织。自由巯基定量是抗体等蛋白质类生物制品的一个重要检测项目。例如,含有自由巯基的抗体的生物学功能有时比完整抗体会有所下降,甚至差距很大。因此,快速响应并精确定量蛋白质类生物制品中的自由巯基,对产品的早期工艺开发和后期生产监控都至关重要。


    自由巯基定量

    巯基和二硫键往往以活性基团形式参与酶催化、辅助因子结合以及蛋白质活性构象的维持。自由巯基含量对蛋白的性质和存在方式有很大关系,是生物制药过程中质量检测的重要环节。


    Ellman法是检测自由巯基浓度的常规方法,原理为DTNB试剂与游离巯基反应生成2-硝基-5-硫代苯甲酸(TNB-),若在中性或碱性pH条件下的水中可以离子化,生成TNB2-二价阴离子。这种TNB2-离子呈现黄色,通过测定在412nm可见光吸光度就可以定量TNB2-,然后可以用半胱氨酸标准品定量巯基或者基于摩尔吸收率定量巯基的方法对自由巯基进行定量。


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    百泰派克生物科技BTP基于CNAS/ISO9001双重质量认证体系建立七大检测平台,其中自由巯基含量检测平台,通过CNAS认证,具有完整的方法学开发和转让能力。BTP还提供其他生物制品表征 相关的服务,可点击了解。


    百泰派克生物科技生物制品表征服务内容


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    中/英文项目报告

    在技术报告中,百泰派克生物科技会为您提供详细的中/英文双语版技术报告,报告包括:


    1. 实验步骤(中英文)

    2. 相关的质谱参数(中英文)

    3. 原始数据

    4. 自由巯基定量结果


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    相关服务

    生物制药分析

    二硫键/游离半胱氨酸检测

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