蛋白质是生命活动的核心，研究其结构和功能对蛋白质组学、结构生物学、生物制药等领域至关重要。为了获得可用于质谱分析的高质量肽段，蛋白样品必须经过精准的酶解处理，其中胰蛋白酶（Trypsin）因其高度特异性成为最常用的蛋白酶之一。
胰蛋白酶能够特异性水解赖氨酸和精氨酸残基羧基端的肽键。未经修饰的胰蛋白酶易发生自水解，产生的片段可能干扰蛋白质测序或高效液相色谱（HPLC）肽段分析。此外，自水解还可能产生伪胰蛋白酶，这种物质已被证实具有类似糜蛋白酶的底物特异性。质谱级修饰胰蛋白酶是通过还原性甲基化修饰的猪胰蛋白酶，能够抵抗蛋白水解消化作用。在酶稳定性测试中，未发现修饰胰蛋白酶发生自水解，同时其活性保持能力优于普通胰蛋白酶。
产品详情
百泰派克生物科技提供的胰蛋白酶（测序级）是专为蛋白质质谱分析（LC-MS/MS）优化的高纯度胰蛋白酶，适用于蛋白酶解、蛋白质组学、抗体分析、翻译后修饰研究等应用。
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产品规格 |
胰蛋白酶冻干粉（100 μg） |
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复溶缓冲液（0.5 mL） |
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分子量 |
23 kDa |
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储存条件 |
冻干粉于 -20°C 保存；复溶后溶液于 -80°C 保存 |
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最佳pH值 |
7-9 |
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保质期 |
在 -20°C 条件下可保存24个月 |
产品特点
1、高纯度
280nm检测波长下，色谱纯＞95%，确保酶解高度特异。
2、低自水解
优化的酶制备流程显著降低胰蛋白酶自身肽段产生，提升质谱数据质量。
3、高稳定性
在推荐条件下储存可长期保持酶活性，确保实验重复性与数据可比性。
4、批次一致性强
通过严格质控体系，批间酶活差异小于5%，适用于长期研究项目。
5、广泛兼容性
适用于细胞裂解液、组织提取物、重组蛋白等多种样本，兼容MALDI-TOF、Q-TOF、Orbitrap等质谱平台。
6、高度特异性
特异切割K和R残基的羧基端，生成高均一性肽段，有利于后续数据库匹配和定量分析。
使用方法
1、胰蛋白酶复溶
（1）冻干粉胰蛋白酶推荐用50 mM醋酸（HAc）或1mM盐酸（HCl）复溶，确保酶活性稳定。
（2）复溶后可等分分装，-80 ℃长期保存，避免多次冻融导致酶活性下降。
2、酶解条件
（1）pH适用范围：7.0-9.0
（2）用量：推荐1:100~1:25（w/w）
（3）温度：37℃，通常4-16小时（具体时间根据实验需求调整）
3、酶解终止
为了终止酶解，避免过度消化，可以采用以下方法：
（1）降低温度：将样品存放于-20或更低温度储存
（2）添加终止试剂：如终浓度0.1%三氟乙酸（TFA）
应用
1、蛋白质组学
（1）蛋白质鉴定（LC-MS/MS）
（2）翻译后修饰研究（磷酸化、乙酰化、糖基化等）
（3）蛋白定量分析（TMT、iTRAQ、Label-Free）
2、结构生物学
（1）X射线晶体学样品制备
（2）冷冻电镜结构分析
（3）蛋白-蛋白互作验证（如XL-MS）
3、生物制药
（1）单克隆抗体（mAb）结构分析
（2）抗体药物一致性与异质性研究
（3）蛋白药物稳定性和降解路径分析
百泰派克生物科技的胰蛋白酶（测序级）采用高纯度、低自水解的优化设计，专为蛋白质组学、结构生物学、生物制药等高精度研究打造。其高特异性、低背景噪音、质谱兼容性，确保蛋白酶解的精准性和可重复性，是高质量蛋白研究的理想选择。
FAQs
Q1: 测序级胰蛋白酶与普通胰蛋白酶有何区别？
A1: 测序级胰蛋白酶经过TPCK处理，去除了胰凝乳蛋白酶活性，降低非特异性切割，确保酶解的高特异性和低背景噪音，适用于质谱分析（LC-MS/MS）。普通胰蛋白酶可能含有较高的自水解产物，影响蛋白鉴定的可靠性和数据质量。
Q2: 是否需要预活化？
A2: 无需预活化。百泰派克生物科技的测序级胰蛋白酶经过优化设计，复溶即用，无需额外处理即可直接用于蛋白酶解实验。
Q3: 是否适用于膜蛋白样品？
A3: 适用于膜蛋白样品。建议结合SDS、尿素或有机溶剂进行前处理，以提高胰蛋白酶在疏水蛋白环境中的酶解效率。
Q4: 胰蛋白酶复溶后如何储存？
A4: （1）复溶后建议等分分装，-80℃长期保存，避免多次冻融导致酶活性下降。（2）若短期内使用，可存放于-20℃，但应避免反复冻融，以保持最佳酶解效果。
Q5: 如何防止胰蛋白酶自水解？
A5: （1）适量添加Ca²⁺（如1 mM CaCl₂）可提高胰蛋白酶的稳定性，减少自水解影响。（2）使用推荐的缓冲体系，避免极端pH影响酶活性，确保蛋白酶解的高效性。
Q6: 是否适用于iTRAQ/TMT标记实验？
A6: 完全兼容iTRAQ和TMT标记实验。为确保实验效果，建议在标记反应前进行脱盐处理，去除多余试剂，避免干扰后续实验。
