• rLys-C(测序级)
  • 货号: MSP-PR03
  • 产品类型: 蛋白消化酶
  • 规格: 5 x 20μg
  • 赖氨酸内切酶(Lysyl Endopeptidase,简称Lys-C)是一种重要的蛋白质水解酶,因其极高的特异性,能够选择性地切割蛋白质中赖氨酸残基(Lys)羧基端的肽键,被广泛应用于蛋白质质谱(MS)测序分析和蛋白质组学研究中。然而,传统天然来源的Lys-C酶活性和纯度存在一定波动,难以满足日益严格的研究需求。因此,利用重组表达技术生产的重组赖氨酸内切酶(rLys-C)逐渐成为科研与工业应用的主流。
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赖氨酸内切酶(Lysyl Endopeptidase,简称Lys-C)是一种重要的蛋白质水解酶,因其极高的特异性,能够选择性地切割蛋白质中赖氨酸残基(Lys)羧基端的肽键,被广泛应用于蛋白质质谱(MS)测序分析和蛋白质组学研究中。然而,传统天然来源的Lys-C酶活性和纯度存在一定波动,难以满足日益严格的研究需求。因此,利用重组表达技术生产的重组赖氨酸内切酶(rLys-C)逐渐成为科研与工业应用的主流。

 

产品详情

百泰派克生物科技的rLys-C(测序级)具有极高的赖氨酸切割特异性。在pH 8.0–9.0范围内酶活最优,在高变性条件(如8M尿素)下依旧保有蛋白水解能力,特别适用于处理常规酶难以完全消化的目标蛋白。

 

产品以冻干粉或冷冻液形式提供,并配套优化的重构缓冲液,用于提高复溶后酶液的稳定性。rLys-C 适用于在溶液中或凝胶中的单一蛋白或复杂蛋白混合物的高效酶解。

 

产品规格

rLys-C 冻干粉(20 μg)

复溶缓冲液(0.5 mL)

生物来源

来源于大肠杆菌重组表达

储存条件

冻干粉:-20 °C 保存;复溶后溶液:-80 °C 保存

最佳pH

8.0

保质期

在 -20 °C 条件下可保存24个月

 

产品特点

1、纯度

纯度 >99.9%,基于280 nm条件下HPLC检测rLys-C峰面积进行测定。

2、高度特异性

非特异性切割 <5%;可在赖氨酸残基的羧基末端(C端)实现特异性切割,形成明确且可预测的酶解模式。

3、优异的耐变性剂性能

在8M尿素等变性条件下依然保持酶活。

4、高纯度,低自水解

测序级 rLys-C 可有效降低背景干扰,保证质谱图谱清晰。

5、适合复杂样品

适用于多类难处理蛋白,包括难溶蛋白及耐蛋白酶降解的结构蛋白。

6、灵活应用

可与其他蛋白酶(如胰蛋白酶)联合使用,以提高 MS 分析中的蛋白质组覆盖度。

使用方法

1、酶复溶

(1)冻干粉建议使用推荐复溶缓冲液或50 mM醋酸/1 mM盐酸(HPLC级)复溶;

(2)复溶后可分装于–80℃保存,避免多次冻融;液体制剂为即用型,使用方便。

2、推荐酶解条件

参数

条件

酶:蛋白比例(w/w)

1:25 ~ 1:100

最佳pH范围

8.0

反应温度

37℃

消化时间

3 ~ 4小时(可根据样品类型调整)

3、酶解体系兼容性

(1)可稳定作用于8 M尿素、4 M胍盐等变性体系;

(2)与胰蛋白酶联合使用,可提高酶解完整性与肽段覆盖率。

4、反应终止方法

(1)降温至–20℃以下保存;

(2)或添加终止试剂,如0.1%三氟乙酸(TFA)或1 mM PMSF,防止过度酶解。

应用场景

1、蛋白质组学分析

样品预酶解、深度鉴定、低丰度蛋白富集。

2、结构生物学

变性或结构稳定蛋白的初步裂解。

3、双酶策略优化

与胰蛋白酶联合使用,提升蛋白质鉴定的准确性与广度。

4、复杂样品处理

适用于组织提取物、膜蛋白、抗体等难酶解样本。

百泰派克生物科技的rLys-C(测序级)结合高纯度、高特异性与强耐受性的优势,是实现精准、高效蛋白预处理的理想选择。其在复杂、变性样品中的优异表现,为蛋白质组学研究、结构生物学探索及生物制药开发提供可靠的酶解解决方案。欢迎联系我们获取更多产品信息与技术支持。

FAQs

Q1: rLys-C 的来源和特点是什么?

A1: rLys-C 来源于铜绿假单胞菌蛋白酶IV,在大肠杆菌中重组表达,能特异性切割赖氨酸残基的羧基侧。

Q2: rLys-C 能在变性剂中使用吗?

A2: 是的,rLys-C 在高达 8M 尿素、4M 胍盐等高变性条件下仍能保持蛋白水解活性,适用于变性样品的前处理。

Q3: rLys-C 和胰蛋白酶有何区别?

A3: rLys-C 专切赖氨酸残基,而胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸。联合使用可提高酶解效率和蛋白鉴定覆盖率。

Q4: rLys-C是否适用于凝胶中的蛋白质?

A4: 适用,rLys-C可高效消化凝胶内和溶液状态的蛋白质。

Q5: 如何提高蛋白质消化效率?

A5: 确保蛋白样品完全溶解,严格控制pH和温度条件,尤其对抗降解蛋白质可使用8M尿素增强消化效果。

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