在蛋白质组学研究中,蛋白质酶解的精确性是确保质谱分析准确性和蛋白质覆盖率的关键前提。内切蛋白酶 rGlu-C(MS级)是一种丝氨酸蛋白酶,特异性切割谷氨酸残基C端的肽键。在碳酸氢铵或乙酸铵缓冲体系中,该酶对谷氨酸残基具有高度特异性;而在磷酸盐缓冲体系中,其可同时切割天冬氨酸和谷氨酸残基。rGlu-C 的最适pH范围为4.0–9.0。该MS级酶既可单独使用,也可与其他蛋白酶联合应用,以从蛋白质底物中产生多样化肽段。
产品详情
百泰派克生物科技提供的rGlu-C(测序级)是一种高纯度重组酶,适用于多种蛋白质酶解应用。在4.0-9.0的pH范围内,该酶表现出优异的稳定性和酶活性,因此尤其适用于溶液酶解流程。该酶有助于获得更全面、更准确的蛋白质组学数据。rGlu-C既可单独使用,也可与胰蛋白酶联合使用,以提高肽段覆盖度并提升质谱分析效果。
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产品规格 |
rGlu-C 冻干粉(50 μg) |
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分子量 |
24 kDa |
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储存条件 |
冻干粉于 -20℃ 保存 复溶溶液于 -20℃ 可保存 8 周 |
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最佳pH |
4.0-9.0 |
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保质期 |
-20℃ 可保存36个月 |
产品特点
1、高切割特异性
可根据缓冲体系的不同,在谷氨酸或天冬氨酸残基位点实现特异性切割,从而提高序列覆盖度。
2、高纯度、低背景干扰
采用严格控制的重组表达工艺制备,无杂蛋白污染,可有效降低背景干扰并提高数据质量。
3、优异的稳定性
在较宽的 pH 范围内均可保持良好的酶活性,适用于多样化实验设计。
4、良好的缓冲体系兼容性
兼容多种缓冲体系(如碳酸氢铵、乙酸铵和磷酸盐缓冲液),可提供更高的实验灵活性。
5、多平台适配性
兼容多种质谱平台,包括 MALDI-TOF、Q-TOF 和 Orbitrap,适用于多种类型的生物样本分析。
使用方法
1、酶的复溶与保存
(1)采用 50 mM 碳酸氢铵缓冲液或磷酸盐缓冲液(pH 7.8)进行复溶。
(2)可于 -20°C 或 -80°C 长期保存;应避免反复冻融。
2、推荐酶解条件
(1)适用pH范围:4.0-9.0
(2)推荐酶:底物质量比:1:20(w/w)
(3)反应温度:37°C;反应时间通常为 4-16 小时(可根据实验需求调整)
3、酶解终止方法
为终止酶解反应并避免过度酶解,可采用以下方法:
(1)降低温度:将样品置于 -20°C 或更低温度条件下。
(2)加入终止试剂:例如加入三氟乙酸(TFA),使终浓度达到 0.1%。
应用
1、蛋白质组学研究
可提供与胰蛋白酶互补的切割模式,从而提高质谱鉴定准确性和蛋白质序列覆盖度。
2、蛋白质测序分析
可对长肽段进行精确切割,辅助序列拼接及全长蛋白质验证。
3、翻译后修饰(PTM)分析
有助于提升磷酸化、糖基化等修饰位点的检测能力,提高 PTM 分析灵敏度。
4、结构生物学研究
可准确界定蛋白质结构域和功能位点,支持蛋白质构象与功能研究。
5、复杂蛋白质混合物分析
能够高效酶解高复杂度样品,提高肽段检出能力,并提升质谱分析表现。
百泰派克生物科技的rGlu-C(测序级)兼具高特异性、优异稳定性和广泛兼容性,可为蛋白质组学与蛋白质分析提供高效、精准的解决方案,并支持对蛋白质结构与功能开展更深入、准确的研究。
FAQs
Q1: rGlu-C 的主要切割位点是什么?
A1: rGlu-C 可特异性切割谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)残基羧基端的肽键,其具体切割特异性受所用缓冲体系影响。
Q2: rGlu-C 的切割特异性在不同缓冲体系之间如何变化?
A2: 在碳酸氢铵和乙酸铵缓冲体系中,rGlu-C 主要切割谷氨酸(E)残基羧基端的肽键;在磷酸盐缓冲体系中,其切割范围可扩展至谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)残基对应位点。
Q3: rGlu-C 是否可用于磷酸化或其他翻译后修饰(PTM)研究?
A3: 是的,rGlu-C 酶解生成的肽段适用于磷酸化、糖基化及其他翻译后修饰(PTM)信息的获取与分析。












