糜蛋白酶是一种丝氨酸内切蛋白酶，能够特异性切割酪氨酸（Tyr）、苯丙氨酸（Phe）、色氨酸（Trp）和亮氨酸（Leu）的C端肽键。此外，它还能切割部分甲硫氨酸（Met）、丙氨酸（Ala）、天冬氨酸（Asp）和谷氨酸（Glu）的C端肽键。残留的胰蛋白酶（Trypsin）可通过TLCK（甲苯磺酰赖氨酸氯甲基酮）灭活并纯化。该蛋白酶可被钙离子（Ca²⁺）激活并稳定其活性。
百泰派克生物科技基于成熟的酶制剂开发经验，推出高纯度测序级糜蛋白酶解决方案。通过ISO认证生产体系及多维度质控流程，为研究者提供稳定可靠的酶解支持，覆盖从基础科研到工业级应用的全场景需求。
产品详情
百泰派克生物科技的糜蛋白酶（测序级）采用先进的制备工艺，提供高纯度、高特异性的蛋白酶解方案，可与胰蛋白酶联合使用，进一步提高蛋白质鉴定的覆盖率，使蛋白质酶解更加均匀，适用于LC-MS/MS质谱分析、抗体药物分析、翻译后修饰研究等领域。
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产品编号 |
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产品规格 |
糜蛋白酶冻干粉 (50μg) |
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复溶缓冲液（0.1mL） |
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分子量 |
25kDa |
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储存条件 |
冻干粉在-20°C下储存 复溶后溶液于 -80°C 保存（可稳定保存1周） |
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最佳pH |
7.8 |
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保质期 |
在-20°C下可保存24个月 |
产品优势
1、高纯度
通过优化纯化工艺，去除非目标蛋白酶活性和杂质，确保酶解特异性。
2、高特异性
专一切割芳香族氨基酸（Y/F/W/L）残基羧基端，提升肽段可解析度。
3、低自水解
工艺优化降低自身肽段干扰，增强质谱数据准确性。
4、批次一致性好
严格质控，酶活差异控制在<5%，保障实验数据可比性。
5、广泛兼容性
适用于细胞裂解液、组织提取物、重组蛋白等复杂样本，兼容各类质谱平台如MALDI-TOF、Q-TOF、Orbitrap等。
使用方法
1、糜蛋白酶复溶
（1）冻干糜蛋白酶推荐用含2μM CaCl2 的1 mM盐酸（HCl） 复溶，以确保酶活性稳定。
（2）复溶后可等分分装，-80℃长期保存，避免多次冻融导致酶活性下降。
2、酶解条件
（1）pH适用范围：7.0-8.0
（2）用量：推荐1:100~1:50（w/w）
（3）温度：30℃，通常4-16小时（具体时间根据实验需求调整）
3、酶解终止
为了终止酶解，避免过度消化，可以采用以下方法：
（1）降低温度：将样品存放于-20℃或更低温度储存
（2）或添加终止试剂，如0.1%三氟乙酸（TFA）或1 mM PMSF，避免过度酶解。
应用
1、蛋白质组学
提高蛋白鉴定覆盖率，增强低丰度区域解析。
2、抗体结构分析
支持mAb分子表征、抗原结合位点验证等。
3、翻译后修饰研究
适用于磷酸化、糖基化等PTM研究。
4、结构生物学
用于蛋白互作位点定位、晶体学/冷冻电镜前处理。
FAQs
Q1: 糜蛋白酶可以与胰蛋白酶搭配使用吗？
A1: 可以。建议先使用糜蛋白酶进行部分酶解（2-4 小时），随后加入胰蛋白酶继续酶解过夜。这种双酶策略可有效提高疏水区域的肽段覆盖率，优化LC-MS/MS质谱数据质量。
Q2: 反应 pH 超出推荐范围会产生什么影响？
A2: （1）pH < 7.0 可能降低糜蛋白酶的酶活性，导致酶解效率下降。（2）pH > 9.0 可能增加自水解风险，产生额外的背景干扰。 建议使用合适的缓冲体系（如Tris-HCl或NH₄HCO₃）维持pH稳定，确保最佳酶解效果。
Q3: 样品中含有高浓度去污剂如何处理？
A3: （1）建议适当稀释去污剂浓度，减少对糜蛋白酶活性的影响。（2）可选择兼容性去污剂（如 0.1% NP-40），降低对蛋白结构和酶解效率的影响。（3）必要时，可采用脱盐柱或蛋白纯化方法去除去污剂，提高实验稳定性。
Q4: 糜蛋白酶适用于膜蛋白酶解吗？
A4: 适用于膜蛋白消化。建议在酶解前结合SDS、尿素或有机溶剂预处理膜蛋白，以提高糜蛋白酶对疏水蛋白的酶解效率，从而获得更高的蛋白鉴定覆盖率。
