磷酸化修饰肽段富集试剂盒

产品组分	规格	储存条件
Loading buffer	30ml×1	4℃
Wash buffer 1	10ml×1	4℃
Wash buffer 2	10ml×1	4℃
Wash buffer 3	5ml×1	4℃
Elution buffer 1	1ml×1	室温（RT）
Elution buffer 2	1ml×1	室温（RT）
TiO₂材料	20mg×1	室温（RT）
Tip	12根	室温（RT）

 

使用方法

百泰派克生物科技提供完整的操作指南和配套缓冲体系。建议按照以下步骤进行操作，以获得最佳富集效果：

1、样品准备

（1）将酶切后的蛋白样本进行C18柱或等效方式脱盐，并冷冻干燥。

（2）建议起始量为>200µg蛋白酶解产物，重悬于Loading buffer中，确保肽段完全溶解且浓度>2µg/µL。

2、磷酸化肽结合

（1）清洗TiO2材料，重复三次。

（2）将溶解好的肽段与不同比例TiO2材料进行孵育，每次孵育30min。

3、Tip预处理

使用200 µL Loading buffer预平衡Tip三次（每次离心1000 × g，1 min）。

4. 洗涤杂质

（1）将孵育后的TiO2材料转移至Tip上。

（2）依次使用3 × 200 µL Wash buffer 1/2（每次离心1000 × g，1 min），去除未结合和非特异肽段。

（3）再用200 µL Wash buffer 3进行一次最终洗涤。

 5、洗脱磷肽

（1）更换新的收集管，加入60 µL Elution Buffer1静置3分钟，离心收集，再加入60 µL Elution Buffer2，重复一次，共120 µL。

（2）建议立即将洗脱液调至pH<3以避免高pH下磷酸基水解，后使用真空浓缩仪将洗脱液浓缩干燥。

6、下游分析

使用20 µL 0.1%甲酸重悬干燥产物，直接用于LC-MS/MS分析或肽段浓度测定。

产品优势

百泰派克生物科技的磷酸化修饰肽段富集试剂盒在磷酸化组学研究中表现出以下优势：

✅ 高选择性结合

二氧化钛（TiO2）材料与磷酸基团可以特异性结合，显著提升目标肽段的富集效率，减少背景干扰。

✅ 快速高效

标准流程2小时内可完成，适合中低通量实验室快速推进样品处理。

✅ 操作简便

材料+Tip结构设计避免了繁琐操作，支持常规台式离心设备，无需特殊仪器。

✅ 缓冲液即用

试剂盒配套缓冲液均为预配型，确保重复性与稳定性，无需自行调配。

✅ 兼容性强

富集产物可直接用于多种下游分析平台，如DDA、DIA、PRM等质谱技术。

应用场景

百泰派克生物科技的磷酸化修饰肽段富集试剂盒适用于基础研究与转化医学等多个领域，尤其适合以下应用方向：

1、磷酸化位点识别

用于定位蛋白中Ser/Thr/Tyr残基的磷酸化修饰位置。

2、信号通路研究

配合质谱技术，揭示信号转导过程中激酶/底物间的磷酸化状态变化。

3、药物机制评估

通过比较处理前后磷酸化谱变化，探究药物干预作用。

4、靶点筛选与验证

帮助识别疾病相关磷酸化事件，辅助靶点发现与验证。

5、多样本组学分析

结合TMT/iTRAQ标签实现多条件下的磷酸化定量分析。

磷酸化是调控蛋白质功能和细胞行为的关键修饰，而高效富集磷酸化多肽则是研究磷酸化修饰的基础。百泰派克生物科技的磷酸化修饰肽段富集试剂盒以其科学的原理设计、优化的操作流程和高适配性，为广大科研人员提供了高性价比的前处理工具。

无论您是从事信号通路研究、激酶靶点筛选、疾病机制探索，或是进行高通量磷酸化组学定量分析，百泰派克生物科技都能为您的科研工作提供可靠支持。欢迎访问我们的官方网站了解更多信息，或联系我们获取技术支持与定制化建议。