乙酰化修饰肽段富集试剂盒

乙酰化是蛋白质翻译后修饰（PTM）中最重要的修饰之一，广泛存在于细胞内各种蛋白质上。乙酰化修饰通过酰基转移酶将乙酰基添加到蛋白质的赖氨酸残基上，调控蛋白质的活性、稳定性、相互作用和细胞内定位。它在细胞周期、基因表达、DNA修复、信号传递等多种生物学过程中扮演着至关重要的角色。随着研究的深入，乙酰化的异常被认为与许多疾病相关，如癌症、神经退行性疾病、心血管疾病等。

由于乙酰化修饰通常处于低丰度状态，且其修饰位点分布复杂，传统方法常面临背景信号高、选择性差、富集效率低等问题，导致研究过程中的数据准确性和重复性较差。乙酰化修饰肽段富集试剂盒利用高亲和力的乙酰化结合抗体，能够高效、特异性地富集乙酰化蛋白能够提供更加稳定和高质量的样品，适用于乙酰化位点鉴定、蛋白质组学分析及细胞信号通路研究等多个领域。

产品详情

百泰派克生物科技的乙酰化修饰肽段富集试剂盒通过特异性亲和捕获技术，针对乙酰化的赖氨酸残基（Ac-K）进行选择性富集，适用于细胞、组织样本以及其他生物样品中的乙酰化蛋白。试剂盒基于乙酰化特异性抗体，通过高度选择性的结合实现乙酰化肽段的富集，适合后续的质谱分析等应用。

 

产品组分

 

产品详情	规格	储存条件
Wash buffer 1	30 mL×1	4℃
Wash buffer 2	30 mL×1	4℃
Wash buffer 3	30 mL×1	4℃
Elution buffer	3 mL×1	4℃
抗体	50 µL×1	-20℃
Beads	2 mL×1	4℃

 

使用方法

本试剂盒采用特异性亲和捕获技术，整个实验流程简便，耗时短，适用于不同的实验室环境和实验规模，以下为推荐使用的标准化步骤。

肽段水平乙酰化富集流程

1、样品准备

（1）将酶切后的蛋白样本进行C18柱或等效方式脱盐，并冷冻干燥。

（2）建议起始量为>2 mg蛋白酶解产物，重悬于Wash buffer 2中，确保肽段完全溶解。

2、beads与抗体结合

（1）先用Wash buffer 1清洗beads材料，重复两次；

（2）用200µL Wash buffer 1重悬beads，将适量的抗体加入，4℃旋转孵育2h；

（3）离心分离beads，保留上清。

注：建议使用BCA方法对孵育后上清进行定量，确保抗体全部结合

3、肽段孵育

将重悬后肽段加入beads沉淀中，4℃旋转孵育2h

4、洗涤杂质

（1）离心分离beads；

注：用户可根据自身需求决定是否保留去除乙酰化修饰的肽段溶液

（2）将beads用Wash buffer 2洗涤两次，保留beads；

（3）再用Wash buffer 3洗涤两次，保留beads；

5、洗脱乙酰化肽段

（1）更换新的收集管，加入100 µL Elution Buffer，室温孵育10分钟，离心收集，再加入100 µL Elution Buffer 2，重复一次，共200 µL。

（2）将富集后的乙酰化肽段样本进行C18柱或等效方式脱盐，并冷冻干燥。

6、下游分析

使用20 µL 0.1%甲酸重悬干燥产物，直接用于LC-MS/MS分析或肽段浓度测定。

注意事项

1、处理过程应在低温下进行（如置于冰上操作），以保持乙酰化修饰的稳定性。

2、所有缓冲液应提前冷却并配置新鲜。

3、使用前确保beads已充分预洗。

产品优势

✅ 高特异性和高效性

采用高亲和力的乙酰化结合抗体，确保高选择性地识别和富集乙酰化修饰蛋白。无论是单乙酰化还是多乙酰化修饰，均能高效捕获，避免非特异性结合，提升富集效率。

✅ 操作简便

富集流程经过优化，操作简便且快速，通常一天内完成整个富集过程。所有步骤均有详细的指导和优化，适合实验室日常使用。

✅ 高回收率

优化的亲和富集方法和缓冲液体系，确保高效富集乙酰化肽段，并最大化样品的回收率。

✅ 样本兼容性强

本试剂盒能够处理细胞、组织等多种样本类型，并兼容哺乳动物、小鼠、大鼠等多种物种，具备广泛的应用前景。

✅ 高重复性和一致性

试剂盒的亲和材料具有批间一致性，操作过程标准化，确保实验结果的高重复性，适合长期、大规模的科研工作。

应用

1、乙酰化蛋白质组学

用于大规模蛋白质组学研究，帮助科研人员探索乙酰化修饰的蛋白质，建立蛋白质修饰组学数据库。

2、细胞信号转导研究

乙酰化修饰参与细胞信号传导过程，使用该试剂盒富集乙酰化肽段，有助于揭示细胞内信号通路的调控机制。

3、DNA修复

在 DNA 修复研究中，使用乙酰化修饰肽段富集试剂盒富集参与 DNA 修复的乙酰化蛋白，进一步研究乙酰化修饰在 DNA 损伤修复过程中的作用。

4、神经退行性疾病研究

乙酰化在神经退行性疾病（如阿尔茨海默病、帕金森病）中起着关键作用。该试剂盒可用于研究乙酰化修饰在这些疾病中的作用。

5、药物开发

通过研究乙酰化蛋白的变化，可以为新药物的开发提供依据，特别是在靶向乙酰化酶或乙酰化修饰的蛋白质。