NHS 磁珠试剂盒

在现代蛋白质研究与生物分离过程中，目标蛋白或配体的固定化是实现纯化、富集、检测或功能分析的重要步骤。特别是在免疫沉淀、亲和纯化、生物偶联反应及高通量筛选平台中，如何实现高效、稳定、可控的蛋白偶联载体成为科研人员广泛关注的问题。

NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）活化磁珠因其对伯胺基团的高度专一性和快速偶联特性，成为目前应用最为广泛的活化磁珠类型之一。通过NHS酯与蛋白质或配体表面的氨基反应，可实现稳定的共价结合，同时配合磁力分离技术，大幅提升纯化效率与操作便捷性。但传统的NHS磁珠偶联体系仍面临如活化效率不足、背景结合高、操作复杂或体系不稳定等问题，限制了其在多样性蛋白质样本中的推广应用。为此，百泰派克生物科技推出了性能优化的NHS 磁珠试剂盒(蛋白质纯化-磁亲和分离颗粒)旨在为研究者提供一套标准化、稳定性强、使用简便的蛋白偶联与分离解决方案，适用于多种分子生物学和生物化学实验需求。

百泰派克生物科技的NHS磁珠试剂盒主要由活化NHS磁珠、偶联缓冲液、洗脱缓冲液和说明书等组成，用户只需提供含氨基的蛋白质或小分子配体，即可快速完成偶联步骤。磁珠采用高磁响应性颗粒，兼具优良的分散性与重悬性，适配于手动操作与自动化磁力分选平台。该产品广泛适用于抗体固定化、酶固定、配体筛选、靶蛋白捕获、蛋白复合物富集等多种实验流程，尤其适合中低通量的亲和纯化及目标分子富集。

 

使用流程

以下操作过程以取磁珠样品500 μL，采用1.5 mL EP管，使用磁珠为NHS磁珠为例。

1、蛋白溶液配制

取适量待偶联蛋白用Coupling Buffer溶解，配成浓度为0.1-3.0 mg/mL的蛋白溶液。已经保存于buffer中的蛋白，需要通过透析或者脱盐的方法彻底除去原有buffer里含伯胺基的物质，将配制好的蛋白溶液于4ºC保存备用。

2、磁珠清洗

（1）取500 μL 磁珠于1.5 mL EP管中。

（2）将EP管置于磁性分离架内，收集磁珠，去除上清液。

（3）加1 mL2~8ºC 的预冷的Wash Buffer A于1.5 mLEP 管中，涡旋15 s，使磁珠混合均匀。

（4）将EP管置于磁性分离架内，富集磁珠，去除上清液。

3、生物配体固定

（1）加 500 μL 蛋白溶液于EP管中，涡旋30 s，使其混合均匀。

（2）将EP管涡旋15 s，置于垂直混合仪上，室温混合1~2 h。如果垂直混合不均匀，则反应前30 min，每隔5 min取下EP管涡旋15 s。此后，每隔15 min，取下EP管涡旋15 s。

注：如有需要可以在 4ºC 反应过夜。

（3）采用磁性分离架富集磁珠，保存流穿液。

4、磁珠封闭

（1）加500 μL Blocking Buffer于EP管中，涡旋30 s，将EP管置于磁性分离架内，富集磁珠，弃上清液。

注：Blocking Buffer除了试剂盒中提供的3 M乙醇胺外，也可以使用100 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 8.0等其它封端试剂。

（2）重复“步骤 a)”操作四次。

（3）加500 μL Blocking Buffer于EP管中，涡旋30 s，将EP管置于垂直混合仪中室温反应2 h。

（4）将EP管置于磁性分离架内，富集磁珠，弃上清液。

（5）加1 mL超纯水于EP管中，充分混合，用磁力架富集磁珠，弃上清液。

5、保存

（1）加1 mL Storage Buffer（需客户自备，比如含0.05%叠氮化钠的PBS缓冲液，或者客户根据自己实际需求选择合适的保存溶液）于EP管中，充分混合，用磁力架富集磁珠，弃上清液。重复该操作2次。

（2）加入500 μL Storage Buffer于EP管中，充分混合，4ºC保存备用。

产品优势

✅ 高效偶联，快速稳定

NHS活性基团与蛋白伯胺反应快速，偶联效率高，可在短时间内完成稳定连接。

✅ 磁力分离，操作便捷

高磁响应性颗粒实现快速聚集与清洗，适用于手动及自动磁架平台。

✅ 适配性强，兼容多种蛋白

可用于抗体、酶、配体、小分子等多种类型分子的固定化，适用范围广。

✅ 低非特异结合背景

优化的封闭和洗涤体系有效降低背景，提高下游检测的准确性。

应用

百泰派克生物科技 NHS磁珠试剂盒适用于多种生命科学与生物医药研究场景，主要包括：

1、抗体固定化与免疫共沉淀（Co-IP）

将特异性抗体偶联至磁珠表面，用于靶蛋白捕获及复合物富集分析。

2、蛋白质-蛋白质相互作用研究

固定诱饵蛋白，通过磁分离捕获其互作蛋白，适用于pull-down结合质谱分析。

3、酶固定化与活性保持研究

将功能酶偶联在磁珠上，用于反应循环或底物筛选。

4、小分子配体筛选与靶标富集

偶联小分子药物或化合物，筛选其潜在靶点或与之结合的蛋白。

5、细胞裂解液或血清样本中蛋白纯化

对复杂样本中低丰度或特异性蛋白进行靶向富集。