Anti-Flag 磁珠

该产品具有批间一致性强、背景干扰低、蛋白回收率高等优点，适用于多种下游分析，包括SDS-PAGE、Western Blot、酶学分析及质谱等技术平台。

使用方法

1、样品制备

根据实验样品类型（如细胞裂解液、组织匀浆或体外表达产物）选择合适的裂解方式，建议使用不含强去垢剂的缓冲液保留蛋白功能性。

2、磁珠预处理

（1）用移液器轻轻吹打重悬Anti-Flag磁珠，按照每500ul样品10ul或20ul磁珠悬浊液，取适量Anti-Flag磁珠至一洁净离心管中，加入1 × TBS至最终体积为约0.5ml。

（2）用移液器轻轻吹打并充分重悬Anti-Flag磁珠。置于磁力架上分离10秒，去除上清。重复上述步骤两次。

（3）按照初始体积的量，用1 × TBS重悬Anti-Flag磁珠。

3、蛋白结合反应

（1）加入磁珠与孵育。按照每500u蛋白样品加入20ul磁珠悬浊液的比例加入Anti-Flag磁珠,置于侧摆摇床或旋转混合仪上。室温孵育2小时或4℃℃孵育过夜。

（2）磁分离。孵育完毕后，置于磁力架上分离10秒，去除上清。

（3）洗涤。加入500ul的1 × TBS，用移液器轻轻吹打重悬Anti-Flae磁珠。置于磁力架上分离10秒，去除上清。重复洗涤三次。

4、洗涤过程

酸性洗脱法：本方法为非变性法，比较快速且高效。洗脱后的蛋白保持原有的生物活性，便于后续分析检测。

（1）溶液的配制：酸性洗脱液(0.1M Glycine-HCl, pH3.0)，中和液(0.5M Tris-HCI, pH7.4,1.5M NaCl)。

（2）每20ul原始磁珠体积，加入100ul酸性洗脱液、混匀后置于侧摆摇床或旋转混合仪上，室温孵育5分钟。注:孵育时间不宜超过15分钟。

（3）孵育完毕后，置于磁力架上分离10秒，将上清转移到新的离心管中，并立刻加入10ul中和液，适当混匀。

（4）为了获得最大的洗脱效率，可重复步骤b和c，并将相同样品合并。

（5）洗脱并中和的Flag标签蛋白置于4°℃待用，或者-20°C或-80°C长期保存。

产品优势

✅ 高亲和力与特异性识别

偶联高质量单克隆抗体，精准识别Flag序列，确保目标蛋白特异性结合。

✅ 蛋白损失率低

优化的结合/洗脱条件减少目标蛋白丢失，提高实验回收率。

✅ 非特异性结合率低

磁珠表面封闭充分，降低背景干扰，提升数据可信度。

✅ 操作简便高效

洗涤步骤少，操作时间短，适配多种实验流程，省时省力。

✅ 结合容量优越

蛋白结合能力高达0.6 mg/mL，适合低丰度样品富集。

✅ 保存稳定，性能持久

可在4°C条件下保存长达2年，保持结合性能稳定。

应用

Anti-Flag磁珠适用于多种应用方向，在标签蛋白分析及蛋白互作研究中具有重要价值，常见应用包括：

1、蛋白表达验证与小规模纯化

便捷获取目标Flag标签蛋白用于功能验证、抗体制备等。

2、免疫淀（IP）实验

富集Flag融合蛋白用于Western blot、质谱分析等检测手段。

3、共免疫沉淀（Co-IP）实验

联合互作蛋白识别，辅助构建蛋白互作图谱。

4、蛋白功能及酶活分析

温和洗脱条件下保留蛋白生物活性，适用于活性检测。

5、低丰度蛋白预富集

提高检测灵敏度，优化下游分析结果。

百泰派克生物科技始终专注于蛋白样品制备耗材的研发与供应，致力于为科研用户提供高品质、稳定性强、操作便捷的实验工具。Anti-Flag磁珠凭借其高亲和力、低背景、良好通用性与批间一致性，已成为众多科研项目中的优选富集工具。

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