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质谱鉴定双向电泳蛋白

双向电泳即双向凝胶电泳,是凝胶电泳的一种形式,通常用于分析蛋白质。通过双向电泳将样品中的蛋白质进行分离检测后,可以选取感兴趣的目标蛋白进行质谱鉴定,以实现更精确的鉴定。百泰派克生物科技提供双向电泳获得的兴趣蛋白的质谱鉴定服务。

双向电泳

双向电泳(two-dimensional electrophoresis),也称作双向凝胶电泳(Two-dimensional gel electrophoresis)或二维凝胶电泳,缩写为2-DE或2-D电泳,是凝胶电泳的一种形式,通常用于分析蛋白质。双向电泳是等电聚焦(isoelectric focusing,IEF)和SDS-PAGE的结合。蛋白质混合物在二维凝胶上,首先根据pH值对蛋白质进行等电聚集电泳分离,之后根据蛋白质分子大小进行SDS-PAGE分离。双向电泳完成后,将凝胶进行染色即可得到一个蛋白质二维分布图。常用的染色技术有考马斯亮蓝染色、银染、负染和荧光染色。双向电泳中,通过在电泳时在一条泳道上添加已知相对分子质量的一系列标准蛋白质,可以对样品中的蛋白质的相对分子质量进行估算。

质谱鉴定双向电泳蛋白

通过双向电泳将样品中的蛋白质进行分离检测后,可以选取感兴趣的目标蛋白进行质谱鉴定,从而实现目标蛋白的精确鉴定。对于Coomassie Blue,SYPRO Ruby以及Silver stain染色的样品,均可通过质谱进行蛋白的鉴定。但是,银染的样品有可能会与质谱分析不兼容,推荐使用以下产品或者实验步骤进行银染实验:ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2);Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)。此外,用于质谱鉴定的银染样品不要进行脱色处理。

相关服务

基于SDS-PAGE的蛋白分离
蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定

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