sds-page浓度计算方法

在准备SDS-PAGE凝胶时，凝胶的浓度是指丙烯酰胺的总浓度，它决定了凝胶孔隙的大小，从而影响蛋白质的分离效果。浓度越高，孔隙越小，适合分离小分子量蛋白质；浓度越低，孔隙越大，适合分离大分子量蛋白质。




一、计算凝胶浓度的公式为：




$\text{凝胶总浓度 }$




通常交联剂是指N,N'-亚甲基双丙烯酰胺（Bis），它与丙烯酰胺以固定的比例混合，常见的有1:29（Bis:丙烯酰胺）。




假设你想制备一个12%的聚丙烯酰胺凝胶，如果你使用的是30%的丙烯酰胺溶液（含有丙烯酰胺和Bis的固定比例），那么你需要计算的是如何从30%的母液中得到12%的工作浓度。




二、示例：




如果你想要制备10毫升的12% SDS-PAGE凝胶，使用的30% 丙烯酰胺/交联剂溶液（比如29:1的比例），则需要：




1.30% 丙烯酰胺溶液：

（所需的凝胶浓度/母液的丙烯酰胺浓度）×总体积

$=4mL$




2.去离子水（用于将总体积补充到10 mL）：

总体积 - 丙烯酰胺溶液的体积 - 其他组分的体积

10ml−4ml−其他组分的体积




3.其他组分（Tris缓冲液、SDS、APS、TEMED）根据配方加入固定体积。

如果有其他组分，比如Tris-HCl、SDS、TEMED和APS的体积分别为3.75 mL、0.1 mL、0.05 mL和0.1 mL，则去离子水的体积应该为：

$10mL-4mL-3.75mL-0.1mL-0.05mL-0.1mL=2mL$




因此，你将需要加入2 mL的去离子水。




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