质谱流式cytof
质谱流式细胞术(CyTOF,Cytometry by Time-Of-Flight)是一种先进的单细胞分析技术,结合了流式细胞术的流动特性和质谱分析的高分辨率。这种技术能够在单个细胞水平上同时检测多达几十种甚至上百种蛋白质标记物,提供比传统荧光流式细胞术更深入、更细致的细胞表型和功能信息。CyTOF的工作原理是利用重金属同位素标记抗体,这些抗体特异性地结合到细胞表面或内部的特定蛋白上。细胞通过喷射系统进入质谱仪,其中细胞被雾化并电离,然后通过时间飞行质谱仪(TOF-MS)分析。每种重金属同位素的质量不同,通过测量到达探测器的时间差异,可以准确地鉴定和量化绑定到每个细胞上的不同标记物。与传统荧光流式细胞术相比,CyTOF有几个关键优势:
1.高度多重化:
能够同时检测上百种标记物,远超荧光标签的限制。
2.无荧光背景信号:
使用重金属同位素作为标记,避免了荧光重叠和自发荧光的问题,提高了信号的清晰度和分辨率。
3.单细胞分辨率:
可以对每一个细胞的蛋白表达进行详细分析,有助于深入了解细胞功能和细胞间的异质性。
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