GPF-DIA和Direct DIA:哪个更适合大规模蛋白定量?

    在大规模蛋白质组学研究中,数据独立采集(DIA, Data-Independent Acquisition)技术因其高通量、高重现性和数据完整性,已成为主流。然而,DIA的发展也催生了多种策略,其中以GPF-DIA(Gas Phase Fractionation DIA)与Direct DIA(直接DIA)最为常见。两者在谱图库构建方式、实验流程与适用场景上存在显著差异。本文将系统比较这两种DIA策略,帮助科研人员在不同研究需求下作出科学选择。

     

    一、什么是GPF-DIA?

    GPF-DIA是一种通过气相分级提升谱图库质量的DIA策略。研究人员将混合样本在质谱m/z维度进行分段采集(如每次覆盖一个100–150 m/z的窗口),从而获得更高的MS/MS覆盖度。随后,以这些高覆盖度数据构建实验样本特异性的DIA谱图库,用于后续大批量样本的定量分析。

    ✔ GPF-DIA的特点:

    • 蛋白鉴定更深:适合发掘低丰度、差异性蛋白

    • 谱图库质量更高:针对目标样本构建,具有高度代表性

    • 定量准确性更优:尤其适合机制研究与生物标志物挖掘

    • 实验成本较高:需额外运行多个气相分级样本,增加仪器时间与样本消耗

     

    二、什么是Direct DIA?

    Direct DIA则完全跳过谱图库构建步骤,直接利用软件算法(如DIA-NN、Spectronaut)从原始DIA数据中进行蛋白鉴定与定量。这种“谱库自由”方式显著简化了实验流程,并具备良好的通量扩展性。

    ✔ Direct DIA的特点:

    • 流程更简洁:无需分级与谱图库采集

    • 更适合高通量项目:如临床队列研究、药物筛选等

    • 对样本量要求低:适合样本宝贵或难以批量制备的项目

    • 鉴定深度略逊:对极低丰度蛋白的识别能力有限

     

    三、GPF-DIA vs Direct DIA:核心指标对比

     

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    四、如何选择更适合的DIA策略?

    选择DIA策略的核心在于研究目标与资源配置:

    • 如果您关注的是蛋白鉴定深度与定量精度,如疾病机制解析、功能蛋白筛选或图谱构建,GPF-DIA更具优势。

    • 若研究更强调样本通量、数据处理效率与自动化能力,如大型临床样本队列、药效评估或多时间点干预实验,Direct DIA是更高效的选择。

     

    科学地根据项目需求选用DIA策略,不仅提升数据质量,也能显著优化成本效益比。百泰派克生物科技提供多样化DIA策略支持,满足从基础科研到临床转化的广泛需求。不论您的研究聚焦于生物机制探索,还是临床应用开发,我们都可为您提供定制化蛋白组学解决方案。了解更多DIA策略选择建议或获取典型项目案例,欢迎联系我们!

     

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    相关服务:

    DIA定量蛋白质组学

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