甲醛固定-石蜡包埋(FFPE)组织是生物医学研究与临床病理分析中最常见的样本保存形式,广泛用于肿瘤标本、组织芯片及回顾性队列研究。然而,由于甲醛交联导致蛋白质变性、结构稳定性增强、表位掩蔽等问题,传统蛋白提取和酶切方法往往难以在FFPE样本中实现充分裂解与高效酶解,严重影响下游质谱检测的灵敏度与重复性。
为提升FFPE样品的蛋白组数据质量,百泰派克生物科技开发了专用于石蜡切片/卷样品的蛋白酶切试剂盒,提供从脱蜡、复水、裂解、交联逆转到高效酶解的一站式解决方案,优化后的缓冲体系与酶解策略适配NanoLC-MS/MS平台,特别适合低起始量、高通量、质谱级分析需求。
产品详情
石蜡切片/卷样品蛋白酶切试剂盒基于优化的裂解体系与热诱导交联逆转缓冲液,联合百泰派克生物科技定制的beads酶切策略,实现对FFPE石蜡切片、组织卷样中蛋白的高效释放与完全酶解。特别设计的脱蜡/复水方案与低体积反应体系,确保最大程度保留蛋白质信息,适用于10μm厚度石蜡切片或组织卷样本。
相较于传统自配体系,本试剂盒显著缩短操作时间,提升批间一致性,降低人为误差,并已通过多种临床来源样本的质谱验证。
产品组分
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产品组分 |
规格 |
储存条件 |
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脱蜡液 |
30ml×1 |
RT |
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无水乙醇 |
30ml×1 |
RT |
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75%乙醇 |
30ml×1 |
RT |
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Lysis buffer |
10ml×1 |
-20℃ |
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Beads |
200μl×1 |
4℃ |
产品特点
1、交联逆转与蛋白释放
通过专门的裂解缓冲液和热处理,打破甲醛交联,释放蛋白质。
2、独特酶切体系
采用beads富集蛋白,经过Trypsin酶切,提升酶切效率,确保低丰度蛋白质得到充分切割。
3、高通量与低起始量兼容性
适用于微量石蜡切片或组织卷,满足高通量筛选需求。
4、兼容主流质谱平台
与Orbitrap、TripleTOF等LC-MS/MS平台兼容,确保数据质量。
使用方法
1、脱蜡与复水
将石蜡切片或组织卷置于1.5mL管中,加入脱蜡液,至脱蜡完全。后梯度醇洗至纯水状态。
2、裂解与交联逆转
加入裂解缓冲液,95°C加热逆转交联,释放蛋白质。
3、烷基化
加入烷基化试剂进行烷基化处理。
4、酶解反应
按照beads酶切步骤对烷基化之后的蛋白进行Trypsin酶切,37°C酶解14-16小时。
5、酶解终止与样本净化
可配合C18 tip或SPE柱进行脱盐与纯化,获取MS-ready肽段。
适用场景
1、肿瘤组织FFPE样本蛋白质组学分析。
2、临床石蜡病理切片的分子标志物研究。
3、组织芯片微区样本蛋白酶解准备。
4、低起始量石蜡样本(如针吸活检)蛋白组制备。
5、回顾性队列临床样本标准化蛋白组前处理。
FAQs
Q1: 本试剂盒是否可用于染色后的石蜡切片?
A1: 可用于H&E染色样本,但建议使用未染色切片以避免染料对MS信号干扰。若使用染色样本,请增加洗涤步骤去除残留。
Q2: 试剂盒可以应用于哪些类型的组织样本?
A2: 该试剂盒适用于各种石蜡切片和石蜡包埋的组织样本,包括但不限于肿瘤组织、正常组织、病变组织等。
Q3: 能否处理多切组织卷?
A3: 支持处理最多10切10μm厚的组织卷,建议根据组织密度适当调整裂解液体积与酶用量。












