百泰派克生物科技的培养基上清蛋白酶切试剂盒专为细胞培养液样品设计，兼顾背景去除与蛋白回收效率，优化酶解条件，显著提升MS兼容性与蛋白鉴定数量。适用于细胞分泌组学、条件培养液分析、胞外囊泡研究等多种研究场景，适配多平台质谱系统（如Orbitrap、TripleTOF、TIMS-TOF等）。
细胞培养液作为胞外环境的模拟系统，广泛用于研究细胞分泌机制、细胞-细胞通讯、外泌体分泌、药物应答等。然而，直接采集的培养基上清液中蛋白含量低、盐离子和表面活性剂含量高、背景干扰严重，严重影响下游酶解效率和质谱检测灵敏度，是分泌组学研究中的技术瓶颈之一。
尤其是FBS（胎牛血清）或BSA等添加剂引入的高丰度背景蛋白，会掩盖低丰度细胞来源蛋白信号，造成质谱识别偏倚。此外，上清液中蛋白易降解，且传统TCA沉淀、乙醇沉淀等富集方法常伴随蛋白损失与重溶困难，酶解步骤难以标准化。
为此，百泰派克生物科技开发了培养基上清蛋白酶切试剂盒，专为解决低丰度、复杂背景样本的蛋白酶切难题而设计。该产品优化了蛋白变性、还原、烷基化与酶解条件，配合独特的反应体系，有效提高酶切效率与蛋白鉴定覆盖度，显著提升培养基上清液中蛋白质组分析的灵敏度与可靠性。
产品详情
百泰派克生物科技的培养基上清蛋白酶切试剂盒是一款即用型试剂盒，专为处理细胞培养上清液中的低丰度蛋白设计，适配常规培养基体系（如含FBS/无FBS DMEM、RPMI-1640、MEM、IMDM等）。试剂盒核心组分包括优化的裂解缓冲液、变性/还原/烷基化混合液、高活性胰蛋白酶，以及专用反应缓冲体系，确保蛋白在温和条件下充分变性并高效酶解。
产品特性
1、有效去除培养基中的盐、糖、血清蛋白等干扰成分。
2、酶解效率高，适用于多种分泌组蛋白质的高覆盖鉴定。
3、操作流程简单，标准化程度高，支持自动化处理。
此外，本试剂盒适用于多种上清液处理流程，包括：
1、标准培养基（DMEM、RPMI-1640、MEM等）。
2、血清培养/去血清培养样本。
3、条件培养基处理样本（如药物刺激、缺氧处理）。
注意事项
1、Lysis buffer 1需要现用现配：混合Lysis bufferA和B组分。
2、样品制备完成后及时使用或分装保存在-80℃。
3、操作过程中尽量避免泡沫的产生，以免影响蛋白结合效果。
4、推荐使用低蛋白吸附离心管收集洗脱液，避免低丰度蛋白附着在管壁上造成样品损失。
5、不同批次间培养基上清样品的蛋白浓度存在差异，建议先进行预实验确定最佳浓缩比例和孵育时间。
产品组分
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产品组分 |
规格 |
储存条件 |
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Wash buffer 1 |
2ml×1 |
RT |
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Wash buffer 2 |
8ml×1 |
RT |
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Lysis buffer 2 |
1.2ml×1 |
RT |
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Elution buffer 1 |
100ul×1 |
RT |
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Elution buffer 2 |
1ml×1 |
RT |
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Lysis bufferA组分 |
3.75mg×1 |
RT |
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Lysis bufferB组分 |
1ml×1 |
RT |
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Beads |
0.8mg×1 |
4℃ |
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Enzymes |
4ug×1 |
-20℃ |
使用方法
百泰派克生物科技的培养基上清蛋白酶切试剂盒提供一套既严谨又灵活的标准化样品处理方案。以下流程可帮助用户轻松完成培养基上清样本的蛋白酶解准备，适用于后续的LC-MS/MS分析。若需适配特殊样本或自动化操作平台，可根据实验需求作微调。
1、样本准备
若培养基上清中蛋白浓度很低，最好将培养基上清浓缩后再进行富集操作。取100-200 μL浓缩后培养基上清样本，置于洁净EP管中。
2、高丰度蛋白去除
（1）取适量预洗磁珠，加入到对应体积的培养基上清样品中。
（2）充分混匀，在旋转混匀器上孵育10-15分钟。
（3）使用磁力架吸附磁珠，对磁珠进行清洗。
（4）将低丰度蛋白从磁珠上裂解下来。
3、低丰度蛋白酶切
（1）用酶切缓冲液稀释蛋白溶液后，进行过夜酶切。
（2）酶切后用洗脱液回收肽段溶液。
4、酶解终止与样本清理（可选）
若需终止反应或进行脱盐等清理步骤，可结合实验需求选择配套终止方案或后续处理模块。所得肽段可直接用于LC-MS/MS等质谱平台分析。
百泰派克生物科技同时提供样品脱盐、肽段富集、质谱检测等一站式服务，支持从样本制备到数据分析全流程外包。
产品优势
✅ 适配复杂样本体系
针对含FBS或化学定义培养基开发，显著降低背景蛋白干扰。
✅ 高效酶解体系
酶活性稳定、效率高，适用于低浓度分泌蛋白的精准识别。
✅ 标准化流程
一体化操作步骤减少人为误差，提升实验重现性和数据一致性。
✅ 兼容多种质谱平台
酶解产物适用于Orbitrap、Q-TOF、TIMS-TOF等主流平台。
✅ 节省时间与资源
避免繁琐的TCA/乙醇沉淀、滤膜浓缩等步骤，大幅缩短样本准备时间。
✅ 支持高通量分析
适用于自动化液体处理平台，满足大规模样本分析需求。
应用场景
该试剂盒可广泛应用于以下研究领域：
1、分泌组学研究（Secretomics）
探索细胞在刺激、胁迫或疾病状态下的分泌蛋白变化。
2、肿瘤微环境研究
分析肿瘤细胞或免疫细胞在共培养条件下释放的蛋白，揭示肿瘤相关的胞外信号因子与潜在标志物。
3、细胞因子与生长因子分析
解析巨噬细胞、T细胞、干细胞等分泌的小分子调节因子。
4、外泌体与胞外囊泡蛋白研究
去除可溶性蛋白后，结合外泌体提取用于表面标志物或内容物分析。
FAQs
Q1: 是否兼容含FBS培养基？是否会受到血清白蛋白影响？
A1: 本试剂盒经过专门优化，可适用于含FBS和无FBS培养基。虽然FBS中的白蛋白等高丰度背景蛋白确实可能影响低丰度分泌蛋白的检测，但本试剂盒在缓冲体系与酶解条件上具备良好抗干扰能力。建议在实验设计中采用无血清诱导条件或FBS预脱蛋白处理，以提高分泌组检测的特异性和灵敏度。
Q2: 是否提供后续的质谱分析服务？
A2: 百泰派克生物科技不仅提供高质量样品处理产品，同时配备先进的质谱平台（如Orbitrap Fusion Lumos、timsTOF Pro等），可为您提供从样品酶解、肽段净化到LC-MS/MS检测及数据分析的一站式服务，涵盖定量（TMT、DIA、Label-free）及翻译后修饰（PTM）分析。
Q3: 可否用于胞外囊泡相关样品的处理？
A3: 完全可以。在去除上清液中游离蛋白后，提取的胞外囊泡蛋白样品可直接使用本试剂盒进行后续蛋白酶解分析。试剂盒温和高效的反应体系可兼容膜性结构相关蛋白，适用于胞外囊泡标志物的高质量鉴定。配合百泰派克生物科技的外泌体分离与富集服务，可进一步提升研究深度与准确性。
