免疫共沉淀Co-IP
免疫共沉淀,简称Co-IP,是一种广泛应用于发现和检测蛋白质与蛋白质相互作用的技术,优点是可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合物。百泰派克生物科技提供Co-IP分析蛋白互作的服务。
Co-IP技术通过利用某一特定蛋白(诱饵蛋白)的特异性抗体间接捕获与该诱饵蛋白结合的蛋白,来鉴定天然状态下的蛋白与蛋白相互作用。作为免疫沉淀(IP)实验技术的一种,Co-IP实验不仅可以捕获和纯化主要目标-诱饵蛋白,而且还可以捕获和纯化通过天然相互作用与诱饵蛋白结合的其他大分子。相对于其他鉴定蛋白质互作的方法,Co-IP的优点主要是可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合物。
免疫共沉淀(Co-IP)实验步骤
免疫共沉淀实验主要包括了4个步骤:1.制备蛋白质混合物(细胞裂解液或组织提取物);2.用结合有特异性抗体的亲和珠孵育蛋白质混合物;3.通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质;4.通过SDS-PAGE,蛋白质印迹或质谱(MS)分析检测相互作用蛋白。
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