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蛋白全质谱鉴定

蛋白全质谱鉴定,是利用质谱分析技术进行蛋白质全谱鉴定,或称蛋白质全谱分析。蛋白全谱鉴定的目的在于分析鉴定出混合物样品中尽可能多的肽和蛋白质组分。现代质谱分析技术因其高灵敏性、高精确性和高通量等优点,可以更好地实现蛋白质全谱鉴定。百泰派克生物科技提供基于质谱的蛋白全质谱鉴定服务。

蛋白全质谱鉴定原理

混合物样品中含有不同分子量、不同溶解度和不同修饰的完整蛋白质,因此在进行蛋白全质谱鉴定时,样品经酶切消化成多肽片段,使用鸟枪法蛋白质组学对样品进行鉴定。鸟枪法蛋白质组学的原理是先将蛋白质样品消化成肽段,然后将肽段通过高效液相色谱(HPLC)法进行分离。分离后的肽段直接进入质谱仪进行分析。质谱分析包括了两个过程,一级质谱(MS1)及二级质谱(MS2)。一级质谱获取高校液相色谱MS1中洗脱的肽的质量-电荷比(m/z)和肽的强度(intensity);二级质谱通过对肽段氨基酸序列进行确定,MS2选择单个肽段对其进行萃裂从而得到该肽段的光谱数据。检索软件根据二级质谱信息与相应的数据库比对,结合匹配度打分及错配过滤,可得到肽段的确切序列,进而拼接出各蛋白的完整序列,从而实现对蛋白的鉴定。

蛋白全质谱鉴定应用

蛋白全质谱鉴定可对复杂样本进行蛋白种类分析,适用于生物组织、血液和微生物等复杂样品中蛋白质组分的分析,特别是适用于在某一特定生理状态下研究蛋白质的整体规律或特有蛋白。

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