核蛋白提取试剂盒

在细胞生物学与分子生物学研究中，核蛋白作为细胞内重要的功能性分子，承担着一系列关键的生理任务。它们广泛参与基因表达调控、转录、翻译及RNA剪接和DNA修复等多个生物学过程。核蛋白的功能往往与其在细胞核内的特定结构和相互作用网络密切相关，这使得核蛋白成为解析细胞功能和疾病机制的研究热点，尤其是在癌症、神经退行性疾病及遗传病等领域。核蛋白提取的挑战性在于其复杂的细胞内定位和与其他细胞成分的紧密结合。核蛋白通常与DNA、RNA以及核基质等成分形成复合物。这使得从细胞或组织中高效、稳定地分离纯净的核蛋白成为一项技术性难度较高的任务。

为了满足生命科学研究中对高纯度、高效率核蛋白提取的需求，百泰派克生物科技推出了核蛋白提取试剂盒，该试剂盒能够在较短的时间内高效地从各种细胞或组织样品中提取出核蛋白，解决了传统方法中效率低、操作繁琐等问题，极大提高了核蛋白提取的可靠性和可重复性。

 

产品详情 

核蛋白提取试剂盒采用先进的分离技术，专为核蛋白的提取和纯化设计，能够有效地从不同类型的细胞或组织中分离出高质量的核蛋白。该试剂盒的独特配方包括一系列优化的缓冲液和化学试剂，能够破坏细胞膜和核膜的同时并保护核内的蛋白质，此外，可有效避免核酸污染，确保提取物的纯净度。试剂盒的核心优势在于其简单易用的操作流程。科研人员只需按照步骤添加试剂，即可快速完成细胞裂解和核蛋白分离，极大降低了操作的难度和时间成本。本产品不仅适用于各种常见细胞类型，还能够高效地从各种组织中提取核蛋白，适合用于蛋白质组学研究、信号通路研究、转录调控研究等领域。

 

产品组分

 

产品组分	规格	储存条件
核蛋白抽提试剂A	30mL	-20℃保存，一年有效。一个月内使用可4℃保存。
核蛋白抽提试剂B	5mL
核蛋白洗涤液A	30mL
核蛋白洗涤液B	30mL
核蛋白稀释液	30mL
蛋白酶抑制剂混合液（100×）	1mL

 

使用方法

1、试剂准备

将试剂盒中试剂室温解冻，解冻后放置于冰上。提前4℃预冷离心机。核蛋白抽提试剂A、核蛋白抽提试剂B、核蛋白洗涤液A、核蛋白洗涤液B根据提取的样本量分别取出对应体积的试剂，在使用前按100:1添加蛋白酶抑制剂混合液（100×）备用。

2、样品预处理

（1）对于细胞：收集细胞，4℃，500 g离心5 min，用预冷的PBS洗涤两遍，尽可能吸取残留的PBS。然后置于冰上，按每2000-5000万细胞直接加入1 mL的预冷核蛋白抽提试剂A。 

（2）对于组织：取新鲜的动物组织，用预冷的PBS洗净组织块上附着的脂肪和血液等杂质，用滤纸吸干水分后称重。将组织块剪碎后置于冰上，按每100 mg组织加1 mL预冷的核蛋白抽提试剂A。

3、匀浆

（1）将样品转移到合适大小的预冷玻璃匀浆器中，在冰浴条件下对样品匀浆。 

注：不同的样品所需匀浆次数不同，培养细胞建议匀浆1-2次，组织样本建议5-10次。鉴定方法：取20 uL匀浆后的细胞或组织样品，加入等体积的0.4%台盼蓝溶液，混匀，在显微镜下观察台盼蓝溶液染色阳性（蓝色）细胞数目的比例，当阳性（蓝色）细胞破碎达到50%即可停止匀浆，请勿过度匀浆。若阳性（蓝色）细胞比例未达到50%，适当增加1-2次匀浆，随后按照同样的方法使用台盼蓝溶液进行鉴定。 

（2）对于培养的细胞也可采用涡旋振荡法或反复冻融法来破碎细胞。 

• 涡旋振荡法：将步骤2中已经加入了核蛋白抽提试剂A的样品，在涡旋仪上剧烈涡旋1 min（涡旋10 s，停10 s），然后冰上放置2 min，重复涡旋及冰上放置步骤3次，然后取少量样品台盼蓝染色检测其细胞破碎程度。

• 反复冻融法：将步骤2中已经加入了核蛋白抽提试剂A的样品，在液氮和室温依次反复冻融3~5次，然后取少量样品台盼蓝染色检测其细胞破碎程度。

4、分离核蛋白

（1）将样品匀浆液置于冰上10 min，期间每隔2 min上下颠倒一次，4℃，6500 g离心5 min，收集上清为胞浆蛋白。

注：吸取上清时不要触及沉淀，可以在沉淀上方保留部分上清。 

（2）收集沉淀，用1 mL的核蛋白洗涤液A重悬沉淀。4℃，6500 g离心5 min，收集沉淀。

（3）沉淀中加入1 mL的核蛋白洗涤液B重悬沉淀，在涡旋仪上剧烈涡旋1 min（涡旋10 s，停10 s）。4℃，6500 g离心5 min，再次收集沉淀。 

5、抽提核蛋白

（1）沉淀中加入100 uL的核蛋白抽提试剂B重悬沉淀。在涡旋仪上剧烈涡旋2 min（涡旋10 s，停10 s），然后冰上放置10 min，重复涡旋及放置步骤3次。 

（2）4℃，16000 g离心10 min，收集上清为核蛋白。 

（3）根据收集到的核蛋白样品的体积，加入4倍体积的核蛋白稀释液。此时如果收集到的核蛋白粘度高，可对样品进行超声波处理，直至样品不粘稠。

注：如果出现样品粘度太高导致步骤5.（2）离心后无法分离沉淀和上清，可先加入4倍体积的核蛋白稀释液，并对样品进行超声波处理后再4℃，16000 g离心10 min，收集上清（核蛋白）。

6、保存与使用

得到的核蛋白可分装保存于-80℃冰箱或者用于后续分析。可以使用BCA法测定蛋白浓度，不适用Bradford法测蛋白浓度。核蛋白提取液可直接用于Western Blot、免疫沉淀、质谱分析等实验。

 

结果展示

采用本试剂盒提取的核蛋白SDS-PAGE胶图

产品优势

✅ 高效提取

本试剂盒专为核蛋白的提取设计，采用优化的裂解缓冲液和高效的膜破裂系统，能够快速、有效地从细胞或组织中提取核蛋白。无论是核内的转录因子、核受体，还是与DNA结合的蛋白，本试剂盒都能确保高效提取。

✅ 纯度高

该试剂盒可有效去除细胞质及其他杂质，提取的核蛋白具有较高的纯度，适用于后续的多种实验分析，如Western Blot、免疫共沉淀、质谱分析等。

✅ 操作简便

提供一体化的操作流程，无需复杂的实验步骤，科研人员仅需按要求进行操作，便可得到高质量的核蛋白样本。

✅ 保护蛋白天然结构

本试剂盒在提取过程中含有蛋白酶抑制剂和去污成分，能够有效保护核蛋白的天然结构和功能，确保其在后续分析中保持活性和正确的三维结构。

✅ 多样性兼容性

本试剂盒适用于多种细胞类型，包括动物细胞、植物细胞以及部分微生物细胞。无论是悬浮细胞、贴壁细胞，还是硬质组织样本，都能有效提取核蛋白，满足不同实验需求。

✅ 多用途

提取的核蛋白可用于蛋白质组学、转录调控、DNA修复、信号通路研究等多种研究方向，具有广泛的应用前景。

应用场景

1、蛋白质组学研究

在核蛋白提取后，可进行质谱分析、Western Blot等实验，深入探索细胞核内蛋白的功能和分子机制。

2、转录调控研究

核蛋白参与转录调控过程，使用该试剂盒提取的核蛋白可用于研究转录因子与DNA的相互作用，揭示基因调控机制。

3、DNA修复研究

核蛋白中许多与DNA修复相关的蛋白质，通过该试剂盒提取的核蛋白可用于进一步的DNA修复实验及机制研究。

4、信号通路研究

核蛋白常常是细胞信号传导过程中的重要成员，研究其与其他蛋白的相互作用可以为理解疾病机制提供线索。

5、临床应用

对于研究癌症等疾病中的转录调控、基因突变等机制，本试剂盒能够提取高质量的核蛋白，为精准医学研究提供支持。