• 组蛋白提取试剂盒
  • 货号: PEK-S04
  • 产品类型: 亚细胞蛋白提取试剂盒
  • 规格: 50T,100T
  • 百泰派克生物科技的组蛋白提取试剂盒采用特异性裂解液靶向解离组蛋白-DNA复合物,通过独有步骤去除小分子杂质,可高效从细胞核中提取出高纯度的组蛋白,其优化的低温流程与广谱蛋白酶抑制剂组合可有效维持修饰稳定性,确保下游实验的可靠性和稳定性。
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组蛋白作为真核生物染色质结构的核心组分,不仅是遗传信息存储的载体,也是表观遗传调控的关键执行者。其乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等共价修饰直接关联基因表达、DNA修复及染色体重排等生命活动。对解析疾病机制、药物开发及基础生物学研究具有不可替代的作用。然而,由于组蛋白与DNA具有强结合性、修饰稳定性对提取条件的严苛要求、转录因子等杂质去除困难的因素,使得组蛋白的高效提取面临多重挑战。

因此,百泰派克生物科技推出组蛋白提取试剂盒,该试剂盒采用特异性裂解液靶向解离组蛋白-DNA复合物,通过独有步骤去除小分子杂质,可高效从细胞核中提取出高纯度的组蛋白,其优化的低温流程与广谱蛋白酶抑制剂组合可有效维持修饰稳定性,确保下游实验的可靠性和稳定性。

产品详情

组蛋白提取试剂盒专为高效提取细胞中的组蛋白而设计。采用独特的裂解缓冲液配方,可有效地溶解细胞膜和核膜,使组蛋白释放到溶液中,并避免其他细胞成分的污染。此外,本试剂盒能够保留组蛋白的翻译后修饰,确保后续实验的精准分析。操作过程简便,无需繁琐的溶剂处理。

适用于各种细胞类型,包括哺乳动物细胞、植物细胞及一些真菌细胞。经本试剂盒提取的组蛋白可用于Western Blot、质谱分析、免疫共沉淀、染色质免疫沉淀(ChIP)等下游实验,并广泛应用于表观遗传学、细胞生物学和分子生物学等研究领域。

 

产品组分

 

产品组分 规格 储存条件
裂解缓冲液A 50mL 4
裂解缓冲液B 20mL 4
试剂A 5mL 室温
试剂B 20mL 4

 

使用方法

1、细胞样本

(1)收集不少于1×107个细胞,4℃,1000×g离心5min,用预冷PBS清洗细胞2~3次。

(2)在细胞沉淀中加入裂解缓冲液A,使细胞浓度为1×107cells/ml,4℃翻转孵育至少30min。

(3)孵育结束后,于4℃,10000×g离心10 min,弃上清,保存沉淀。

2、动物组织样本

(1)称量样本,用手术刀或剪刀将样品切成小块(1~2 mm³),用预冷PBS清洗组织2~3次。

(2)每200mg组织加入1mL裂解缓冲液A,充分混匀。将组织置于研磨仪中进行匀浆裂解。

(3)匀浆结束后,于4℃,10000×g离心10 min,弃上清,保存沉淀。

注:上述步骤完成后,上清液将含有细胞质成分,而完整的细胞核留于沉淀中。

3、向上述沉淀中加入400μL裂解缓冲液B(每1×107个细胞/200mg组织),4℃翻转孵育至少30min。

4、孵育结束后,4℃,12000×g离心10 min,将上清液转移到新的样品管中。

5、在上清液中加入1/10体积裂解缓冲液B的试剂A(例:步骤3中加入400 μL裂解缓冲液B,此处加入40 μL试剂A)。4℃翻转1.5 h,冰上孵育30 min。随后4℃,12000×g离心10 min,弃上清;

6、在沉淀中加入100~200μL预冷后的试剂B,吹打混匀,4℃ 12000×g离心10 min,弃上清,重复清洗一次。

7、沉淀自然挥干,加入40μL纯水复溶,混匀并分装后,于-80℃冻存。

此提取方法简便高效,并能最大程度保持组蛋白的天然结构和翻译后修饰,适合用于高质量组蛋白的研究。

histone-protein-extraction-kit

采用本试剂盒提取的组蛋白SDS-PAGE胶图

产品优势

✅ 高效提取组蛋白

通过优化的裂解缓冲液配方和专门的提取步骤,本试剂盒能够快速、有效地从细胞核中提取组蛋白,并保持其天然构象和翻译后修饰。

✅ 减少降解与变性风险

试剂盒中含有蛋白酶抑制剂,能够有效抑制细胞内的蛋白酶活性,减少组蛋白在提取过程中的降解,保证其完整性。

✅ 操作简便

提取过程无需繁琐的有机溶剂处理,操作步骤简化,节省了大量的时间和精力。

✅ 高纯度提取

该试剂盒能够提取高纯度的组蛋白,且不含其他细胞成分或杂质,适用于各种后续实验,包括Western Blot、质谱分析、染色质免疫沉淀(ChIP)等。

✅ 广泛适用性

适用于各种细胞类型,包括动物细胞、植物细胞及部分真菌细胞,提取的组蛋白在表观遗传学和基因调控研究中具有广泛的应用价值。

应用场景

1、表观遗传学研究

组蛋白的翻译后修饰(如乙酰化、甲基化等)在基因表达调控中具有重要作用。通过提取组蛋白,研究人员可以深入分析其在染色质结构重塑和基因转录调控中的作用。

2、细胞生物学与分子生物学研究

组蛋白是细胞分裂、DNA修复、基因激活和沉默等生物学过程的核心成分。该试剂盒可以用于研究细胞周期、DNA损伤修复等过程中的组蛋白作用。

3、疾病机制研究

组蛋白的异常修饰与许多疾病,如癌症、神经退行性疾病等密切相关。通过提取组蛋白,研究人员能够研究疾病过程中组蛋白修饰的变化,为疾病诊断和治疗提供新思路。

4、基因表达与转录调控

组蛋白的修饰直接影响基因的转录活性。通过提取组蛋白并分析其修饰,研究人员可以探讨基因调控的分子机制,并在转基因研究、表观遗传学等领域提供有力支持。

FAQs

Q1: 组蛋白提取是否适用于所有类型的细胞?

A1: 是的,本试剂盒适用于多种细胞类型,包括动物细胞、植物细胞以及部分真菌细胞。但针对某些特殊细胞类型,可能需要优化裂解条件或孵育时间。

Q2: 提取后的组蛋白是否适合Western Blot分析?

A2: 是的,提取的组蛋白纯度高,完全适用于Western Blot等下游分析。为了获得更高精度的实验结果,建议进行适当的蛋白浓度调整。

Q3: 如何提高组蛋白提取的纯度?

A3: 如果提取过程中出现杂质,可以增加离心次数或使用专门的过滤步骤进行进一步纯化。此外,适当延长裂解时间或调整裂解缓冲液的浓度也有助于提高提取效率。

Q4: 如果蛋白提取后有降解现象,如何改进?

A4: 确保提取过程中始终保持低温条件,减少蛋白酶活性。使用充足的蛋白酶抑制剂并减少裂解时间,有助于减少降解现象。

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