stage-tip脱盐试剂盒

图1. Stage-tip脱盐柱实物图

  

使用方法

百泰派克生物科技的Stage-tip脱盐试剂盒的使用流程简便，可在30分钟内完成肽段脱盐和浓缩，主要步骤如下：

 

1、膜片活化  

（1）用200 µL的100% ACN（乙腈）预湿膜片，掌上离心机短暂离心30秒（离心力约2000-3000 rpm）。

（2）用200 µL的0.1% FA（甲酸）溶液平衡膜片，掌上离心机短暂离心30秒。

 

2、肽段加载  

（1）将肽段冻干粉溶解至适当体积（推荐150-200 µL，溶剂为0.1% TFA）。

（2）用移液器缓慢吸入并加载到C18膜片上层。

（3）掌上离心机短暂离心30秒，完成一次上样。

（4）将流穿液回收转移至脱盐柱中，重复一次。

 

3、杂质洗脱  

（1）用200 µL的洗涤缓冲液（0.1% TFA水溶液） 洗涤膜片，掌上离心机短暂离心30秒，去除盐分和小分子干扰物。

（2）重复操作一次。

 

4、肽段洗脱 

（1）用200 μL 80%ACN-20% 0.1%TFA离心洗脱，收集洗脱液。

（2）重复操作一次，回收洗脱液400uL。

 

5、样品浓缩（可选）

通过SpeedVac或氮吹仪轻微浓缩样品，以提高肽段浓度。  

 

处理后的样品可直接用于 LC-MS/MS分析，提高质谱检测的信号强度和定量准确性。

  

产品优势

1、高效脱盐，提升质谱灵敏度

（1）去除盐、尿素、去垢剂，有效降低基质效应，提高信噪比。  

（2）减少离子抑制，优化肽段的检测信号。  

2、低样品损失，适用于肽段总量低的样品，最低上样量可达5ug肽段

（1）高回收率：比传统SPE方法更好地保留肽段。  

（2）低变异性：适用于高通量实验，批间差异小。  

3、操作简便，适配自动化平台  

（1）兼容 96孔高通量工作站，满足大规模质谱样品处理需求。  

（2）无离心、无磁珠，仅依赖移液器即可完成样品处理。

4、适应多种质谱实验  

（1）兼容DDA、DIA、TMT、iTRAQ等不同定量策略。  

（2）适用于翻译后修饰（磷酸化、乙酰化）研究中的样品处理。

  

应用场景

百泰派克生物科技的Stage-tip脱盐试剂盒适用于各种蛋白质组学实验，可应用于：

1、常规蛋白酶解样品的脱盐和浓缩

2、TMT/iTRAQ 标记样品的前处理

3、翻译后修饰（如磷酸化、乙酰化）样品富集

4、复杂生物样本（血浆、组织裂解物）的净化

5、自动化蛋白质组学实验中的高通量样品处理