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产品名称 |
Nano色谱柱(C18,75µm×15cm) |
填料 |
C18 |
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基质 |
ODS |
推荐流速 |
200-400 nL/min |
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粒径 |
1.9 μm |
推荐柱温 |
60℃ |
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孔径 |
120 Å |
pH范围 |
2-8 |
随着蛋白组学、代谢组学以及相关生命科学研究的不断深入,高分辨率、高灵敏度的分离分析工具需求日益增多。Nano级液相色谱技术(Nano-LC)因其能够在极低流速下实现高效分离和高灵敏度检测,逐渐成为蛋白及肽分离分析的常用手段。对于许多需要高精度识别的复杂样品而言,Nano-LC不仅可以减少样品用量和试剂消耗,还能够提升后续质谱检测的信号响应度和覆盖率。因此,一款高品质的Nano色谱柱在蛋白质组学、科研检测、医药研发等领域中扮演着至关重要的角色。基于多年的技术积累与行业经验,百泰派克生物科技作为一家专注于蛋白样品制备耗材的供应商,推出Nano色谱柱(C18, 75 µm × 15 cm),旨在帮助科研工作者与技术人员在微量蛋白/肽分离中获得更加稳定、精准和高通量的分析结果。

图1. 百泰派克生物科技提供的Nano-LC柱
产品详情
百泰派克生物科技的Nano色谱柱(C18, 75 µm × 15 cm)具有内径小、填料均匀、颗粒大小合适、键合相稳定等特点。这款色谱柱核心采用高纯度硅胶基质,并经过严格的C18键合工艺,以确保在低流速环境下具有可靠的分离效率和耐用性。小内径(75 µm)可以最大程度提高分离峰分辨率,更有利于后续质谱对低丰度蛋白肽段信号的捕捉;而15 cm长度则在样品分离深度与分辨率之间取得平衡,能够在保证峰容量的同时减少分析时间和溶剂消耗。
在蛋白质组学与相关科研分析中,样品往往存在分子量分布广、浓度差异大等特点。百泰派克生物科技在设计Nano色谱柱(C18, 75 µm × 15 cm)时充分考虑到这一点,选用稳定性高、惰性好的填料材料,以便在复杂基质背景下保持优异的分离性能。由于出色的表面修饰工艺,该柱能够有效减少色谱峰拖尾和目标分子的非特异性吸附,从而在保持高信噪比的同时,实现更精确的定量分析。
使用方法
1、推荐流动相
A相0.1% FA in water,B相 0.1% FA in 80% ACN。
2、新柱平衡
启用新的色谱柱时,应先以200nL/min的流速,95%有机相冲洗色谱柱30min,之后将流速升至400nL/min,95%有机相冲洗色谱柱30min;调整有机相比例至50%,冲洗色谱柱30min;调整有机相比例至8%,平衡30min。
3、柱前准备
在开始实验前,应先用相应的初始流动相冲洗Nano色谱柱数分钟,确保基线平稳,柱内溶剂环境与待测样品的流动相体系匹配。
4、样品加载
将经蛋白酶解或其他前处理获得的肽段溶液稀释到适当浓度(通常在纳升级体积范围内),采用微量进样装置或自动进样器,小流量进样至Nano色谱柱入口,避免产生高背压或样品过载。
5、梯度洗脱
根据实验需求设置洗脱梯度,在程序升高有机溶剂比例的过程中,亲疏水不同的肽段会依次洗脱,得到良好的色谱分离效果,推荐梯度时间60min-120min,有效梯度8% - 40% B相。
6、检测与数据采集
Nano色谱柱常与质谱联用,实现多肽的高灵敏度检测。随着梯度的进行,质谱仪同步对洗脱液进行连续扫描,并对分离后的各组分进行定性和定量分析。
7、柱后维护
分析结束后,用高有机相(如90%以上的乙腈或甲醇溶液)冲洗色谱柱以去除残留的疏水性分子,并用平衡溶剂恢复柱平衡。长期停用时,可用含适量有机相的保存液(如50%乙腈+0.1%甲酸)保存,以延长色谱柱使用寿命并保持性能稳定。
产品优势
1、高分辨率与高灵敏度
75 µm内径配合高纯度C18填料,有助于在微流速条件下实现目标肽段的高效分离;峰形尖锐、信号增强,为后续质谱分析提供更准确的数据。
2、优秀的峰容量
15 cm的柱长设计既保证了足够的分离深度,也能缩短整体分析时间,在高通量实验中发挥重要作用。
3、稳定耐用
严谨的工艺保证了键合相的稳定性,减少了柱子在频繁使用中的性能衰减风险,让用户能够长期获得一致的分离效果。
4、减少非特异性吸附
填料表面的惰性优化有效降低了样品与柱的非特异性相互作用,降低背景噪音,并提升检测结果的可靠性。
5、广泛适配性
Nano色谱柱(C18, 75 µm × 15 cm)适用于多种梯度洗脱模式和常见的液相系统,兼容多品牌的纳升LC-MS平台,满足不同实验室的分析需求。
应用场景
1、蛋白质组学研究
在复杂蛋白样品如细胞裂解液、组织匀浆液等分析中,对肽段进行高分辨率分离并联用质谱仪,可利用Nano色谱柱(C18, 75 µm × 15 cm)快速筛选并鉴定各种蛋白质,为生物学机制阐明提供有力数据支撑。
2、生物标志物发现
在疾病诊断和药物作用机理研究中,精准分离和检测低丰度肽段对于挖掘潜在生物标志物、开发新型诊断试剂具有重要意义。
3、蛋白修饰检测
通过Nano-LC-MS/MS分析技术,可精确识别蛋白翻译后修饰(如磷酸化、糖基化等),助力深入了解信号通路调控和细胞过程。
4、新药研发与质量控制
在生物制药领域,对生物大分子及其降解产物进行表征和定量时,高分辨率分离可用于鉴别杂质、评估药物一致性,为研发及质控提供可靠数据。
5、微量样品分析
我们的Nano色谱柱(C18, 75 µm × 15 cm)适合用于珍贵或难以大量获取的生物材料(如血清、微生物培养液)的分析,帮助研究人员在样本有限的情况下依然能获得可靠的检测结果。
百泰派克生物科技的Nano色谱柱(C18, 75 µm × 15 cm)具备高分辨、高灵敏的分离能力,能够帮助研究人员在微量蛋白及肽段分析中实现优异的实验效果。其稳定的性能和广泛的适用性,不仅满足蛋白质组学研究的高标准需求,也为生物医药、疾病诊断、分子生物学等领域提供了高效率且可靠的解决方案。通过合理的使用流程与维护方法,用户能够在科研与生产实践中充分发挥该Nano色谱柱的潜力,从而获得更全面、更准确的生物信息,为生命科学研究和产业创新增添更多助力。
FAQs
Q1: 柱子如何激活?
A1: 一般情况下,Nano色谱柱在出厂前已进行必要的预处理,用户只需使用与实验流动相相似的溶剂体系进行短时间冲洗即可投入使用。如果长时间未使用,可考虑用适量有机相冲洗并重新平衡。
Q2: 流速与压力控制应该如何设置?
A2: Nano色谱通常在数百纳升级/分钟甚至更低的流速范围内工作。建议在使用初期从较低流速开始,观察柱背压与洗脱效果,然后根据分离度需求与仪器性能逐步调整。若发现背压过高,应检查是否存在堵塞或死体积。
Q3: 可否用于其他类型样品的分离?
A3: 虽然该柱主要针对肽段的分离设计,但只要样品特性与C18反相模式相适应,例如小分子化合物、部分多肽等,也可尝试该Nano色谱柱进行分离。但需根据目标分子的疏水性和分子量,合理设计流动相体系和梯度程序。
Q4: 如何延长色谱柱寿命?
A4: 保持进样样品的清洁度,避免颗粒及盐类沉积;定期进行高有机相冲洗,清除疏水性杂质;长期存放时使用适当的保存液;避免频繁的压力冲击或大幅度改变溶剂环境,都能有效维护色谱柱的性能。
Q5: 出现峰拖尾或分辨率降低怎么办?
A5: 首先检查流动相和样品基质的配方,确保酸度和有机相比例合理;其次,可排查柱是否发生填料受损或污堵。如果需要,可适当更换过滤器,或尝试用高有机相/清洗液冲洗。若问题持续,建议更换同型号新柱进行对比排查。








